三维(3D)凝胶允许研究细胞外基质(ECM)的机械性能,如密度和刚度,对细胞发展、迁移和形态的影响。与二维(2D)系统不同,三维环境允许细胞延伸同时与所有细胞表面的整合素相互作用,从而激活特定的信号通路。凝胶的刚度或硬度也会影响细胞在三维与二维环境中的不同迁移方式。此外,由于基质纤维与细胞延伸的纠缠,三维系统中可能出现整合素独立的机械相互作用,但在二维系统中则不可能,因为细胞附着在平坦的表面上。
Advanced BioMatrix提供PhotoCol,这是一种纯化的甲基丙烯酰化I型牛胶原蛋白套件,它提供了具有独特可调属性的类似天然3D胶原蛋白凝胶,这些凝胶在不同浓度下制备并以紫外光交联。
艾美捷PhotoCol甲基丙烯酸胶原蛋白,100 毫克,含Irgacure 套件(ABM-5201-1KIT)由纯化的甲基丙烯酰化I型牛胶原蛋白作为核心组分,以及套件中的其他支持试剂组成。
甲基丙烯酸酯化I型胶原蛋白是从完整的牛胶原蛋白中生产的,其中胶原蛋白通过与自由胺基反应进行了改性,主要是赖氨酸残基的ε-胺基团以及N末端的α-胺基团。胶原蛋白分子中超过20%的总赖氨酸残基已经被甲基丙烯酰化。该胶原蛋白从牛皮中提取,含有高单体含量。起始的胶原蛋白材料来自一个封闭的畜群,并通过控制的制造工艺进行纯化。
提供的20 mM醋酸溶液用于溶解冻干的甲基丙烯酰化胶原蛋白,浓度范围从3到8 mg/ml。中和溶液由碱性的10X磷酸盐缓冲液(PBS)组成,它在最终混合物中提供生理盐水和中性pH值。光引发剂溶液由Irgacure 2959组成,需配制在甲醇中(未包含),这允许在365 nm的紫外光下交联胶原蛋白。
甲基丙烯酸酯化I型胶原蛋白,Irgacure 光引发剂存储/稳定性:
产品在冷冻凝胶包中运输。收到后,将胶原蛋白、醋酸和光引发剂存放在2到10°C的温度下。不要冷冻。将中和溶液存放在室温下。产品标签和每个特定批次的分析证书上都印有有效期。当产品按照指示处理和存储时,有效期适用。在使用醋酸溶解胶原蛋白后,胶原蛋白溶液在2到10°C的温度下存放时稳定2个月。
甲基丙烯酸酯化I型胶原蛋白,Irgacure 光引发剂凝胶刚度:
PhotoCol?套件旨在提供不同凝胶刚度的胶原蛋白凝胶,这取决于胶原蛋白的浓度和交联程度。图1展示了在不同浓度下,有和没有紫外光交联时PhotoCol?典型凝胶刚度的结果。
文献参考:
1. Gaudet, I. D., Characterization of MethacryatedType-I Collagen as a Dynamic PhotoactiveHydrogel, Biointerphases, 2012 Dec; 7(1): 25.
2. Drzewiecki K. E., Methacrylation Induces Rapid,Temperature-Dependent, Reversible Self-Assemblyof Type-I Collagen, Langmuir. 2014 Sep 23; 30(37):11204–11211.
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