鼠尾胶原蛋白溶液，I型在细胞培养中的应用

用于 3D 凝胶的 RatCol 是 25 mL 的 4 mg/ml I 型鼠尾端胶原溶液，用于 2D 涂层或 3D 水凝胶。该 3D 凝胶套件配有中和溶液，易于操作。作为端胶原蛋白，用于 3D 凝胶的 RatCol 将形成比端胶原蛋白更坚固的水凝胶。 RatCol I 型酸溶性鼠尾胶原蛋白在 0.02M 乙酸溶液（~pH 3）中含有 100 mg，浓度约为 4 mg/mL。 RatCol 胶原蛋白是可溶性端胶原蛋白。每个产品包括一瓶含有 100 毫克胶原蛋白溶液的瓶子，以及一瓶用于形成胶原蛋白凝胶的预先配制的中和溶液。该产品经过无菌过滤。

艾美捷鼠尾胶原蛋白溶液，I 型，4 mg/ml，25 mL（3D 水凝胶）+ 中和溶液（ABM-5153-1KIT）非常适合表面涂层、为培养细胞提供薄层的制备或用作固体凝胶。 RatCol 胶原蛋白适用于使用多种细胞系的应用，包括肝细胞、成纤维细胞和上皮细胞。

鼠尾胶原蛋白溶液，I 型，4 mg/ml，25 mL（3D 水凝胶）+ 中和溶液存储/稳定性：

存放在2-10°C，并在冷冻胶冰包中运输。不要冷冻。每个特定批次的产品标签和分析证书上列有过期日期。当产品按照指示处理和存储时，过期日期有效。注意事项和免责声明：本产品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请查阅材料安全数据表，了解有关危险和安全操作规范的信息。

涂层程序注意：采用无菌操作规范，以保持产品在胶原蛋白和其他溶液的准备和处理过程中的无菌性。

1. 将所需量的胶原溶液从瓶中转移到稀释容器（如有必要）。使用无菌0.1%醋酸溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度可能在50至100μg/ml范围内。注意：将这些建议作为指导，以确定您培养系统的最佳涂层条件。

2. 向培养表面添加适量稀释的鼠尾胶原。

3. 在室温下盖好孵育1-2小时。吸去任何剩余物质。或者，孵育至表面变干。

4. 孵育后，吸去任何剩余物质。

5. 小心用无菌培养基或PBS冲洗涂层表面，避免刮伤表面。

6. 涂层表面已准备好使用。如果保持无菌性，也可在2-8°C潮湿或晾干存放。

使用提供的中和溶液进行3D凝胶制备程序注意：采用无菌操作规范，以保持产品在胶原蛋白和其他溶液的准备和处理过程中的无菌性。建议在准备胶原蛋白期间将胶原蛋白和其他工作溶液冷藏并放在冰上。

1. 确定所需的胶原体积。

2. 将冷却的中和溶液的1部分转移至无菌混合容器或试管中。

3. 将鼠尾胶原的9部分转移到无菌混合容器或试管中，总共为10部分。

4. 轻轻搅拌混合物或上下移液以混合。不建议使用涡流器。

5. 将鼠尾胶原混合物分配到所需的培养皿或培养器皿中。6. 在37°C孵育1小时以形成凝胶。

鼠尾胶原蛋白溶液，I型部分文献参考：

1. Tanzer, M. L., Cross-linking of collagen. Science, 180(86), 561-566 (1973).

2. Bornstein, P., and Sage, H., Structurally distinct collagen types. Ann. Rev. Biochem., 49, 957-1003 (1980).

3. Tomasek, J.J., and Hay, E.D., Analysis of the role of microfilaments in acquisition and bipolarity and elongation of fibroblasts in hydrated collagen gels. J. Cell Biol., 99, 536-549 (1984).

4. Roeder, B.A., et al., Tensile mechanical properties of three-dimensional type I collagen extracellular matrices with varied microstructure. J. Biomech. Eng., 124, 214-222 (2002).

5. Sato, M., et al., 3-D Structure of extracellular matrix regulates gene expression in cultured hepatic stellate cells to induce process elongation. Comp Hepatol., Jan 14;3 Suppl 1:S4 (2004).

6. Li, G.N., et al., Genomic and morphological changes in neuroblastoma cells in response to three-dimensional matrices. Tissue Eng., 13, 1035-1047 (2007).

7. Karamichos, D., et al., Regulation of corneal fibroblast morphology and collagen reorganization by extracellular matrix mechanical properties. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 48, 5030-5037 (2007).