Advanced BioMatrix玻连蛋白，人，重组，0.5 mg/ml，0.5 mg纯化技术探究

人类维龙蛋白是一种478个氨基酸的蛋白质（1-19个氨基酸=信号结构域），属于蛋白质家族的一员。维龙蛋白是一种丰富的糖蛋白，在血清和细胞外基质中广泛存在。它促进细胞粘附和扩展，抑制终末溶细胞补体途径的膜损伤作用，并与几种丝氨酸蛋白酶抑制剂结合。它是一种分泌蛋白，以单链形式存在，或者由二链形式组成，这两者由二硫键连接在一起。据推测，维龙蛋白可能参与了止血和肿瘤恶性化过程。重组人类维龙蛋白基因（20-398个氨基酸片段）经密码子优化构建，并以大肠杆菌表达为包涵体中的非融合蛋白形式。最终产品通过独特的“温度转移包涵体重折叠”技术重新折叠，并经过色谱纯化。Advanced BioMatrix提供的人类重组维龙蛋白浓度为0.5 mg/ml，其中0.1 mg维龙蛋白溶解在0.2 ml的50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）中。

应用：

维龙蛋白用作薄涂层。对于不同的细胞类型，细胞附着和培养的最佳浓度可能有所不同。可能需要一些实验来确定个体细胞培养系统的最佳条件。典型的涂层浓度为0.5至1.0 ?g/cm?。维龙蛋白已被证明在以下方面非常有效：

1. 适用于广泛的细胞类型的优质涂层。

2. 作为涂层基质蛋白，与E8培养基或Nutristem?培养基结合时，可维持长期的ES或iPS细胞培养。

3. 作为11R标记的重组TF细胞内传递的优质涂层基质材料，用于蛋白衍生iPS方案，具有极低水平的非特异性相互作用。

艾美捷科技强烈推荐Advanced BioMatrix热销产品玻连蛋白，人，重组，0.5 mg/ml，0.5 mg。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

特性描述来源：重组使用大肠杆菌。纯度：维龙蛋白的纯度>95%，基于SDS-PAGE电泳。浓度：维龙蛋白的浓度为0.5mg/ml，其中0.1mg维龙蛋白溶解在0.2ml磷酸盐缓冲液中。无菌性：无生长。功能测试：每批次均已通过使用5-10μg在每孔（6孔板）中的1ml Nutristem培养基进行人类ES细胞（H1）培养的测试。储存：建议将维龙蛋白储存在-20°C以下，并避免反复冻结解冻。产品在2至10°C下稳定，至少可保存30天。

使用说明：请按照以下建议作为指导，确定适合您培养系统的最佳涂层条件。

1. 解冻维龙蛋白，并用无血清培养基或PBS稀释至所需浓度。最终溶液应稀释到足够稀释，使添加的体积均匀覆盖表面。

2. 向培养表面添加适量稀释的物质。

3. 在2-10°C孵育过夜或室温孵育1小时。

4. 吸除剩余物质。

5. 板已准备就绪。

文献参考：

(1) Hyaman E.G., M.D. Pierschbacher, Y. Ohgren, and E.Ruoslahti (1983) Serum spreading factor (Vitronectin) ispresent at the cell surface and in tissues. Proc. Natl.Acad. Scie. U.S.A. 80 (13): 4003-4007

(2) Guokai Chen, et al. Chemically defined conditions for human iPSC derivation and culture. Nature Methods. 8, 424-429 (2011)

(3) Stefan R. Braam. Et al. Recombinant Vitronectin is a Functionally Defined Substrate that Supports Human Embryonic Stem Cell Self-Renewal via aVb5 integrin. STEM CELLS. Vol. 26. Issue 9. 2257-2265 (2008)

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