纤维连接蛋白是一种广泛存在的天然细胞粘附因子,以二聚体形式存在于血浆中,并以多聚体形式存在于细胞外基质和细胞表面。纤维连接蛋白是一种糖蛋白,在两个二硫键连接的220-250 kD亚基上发现。纤维连接蛋白用于促进各种细胞的附着和粘附。除了其细胞附着功能外,纤维连接蛋白还可能与胶原蛋白、肝素和其他细胞表面糖胺聚糖发生相互作用。Advanced BioMatrix的人源纤维连接蛋白浓度为0.5 mg/ml,每1.0 mg纤维连接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纤维连接蛋白是通过Ruoslahti等人(1)的方法从人类血浆中纯化,使用凝胶亲和柱进行灭菌处理,通过0.2?过滤器过滤。
艾美捷人纤维连接蛋白溶液,0.5 mg/ml,1 mg #ABM-5050-1MG应用领域:
纤维连接蛋白可用作薄涂层。不同细胞类型的合适附着和培养浓度可能有所不同。可能需要进行一些实验来确定各个细胞培养系统的最佳条件。纤维连接蛋白不适用于人类。
人纤维连接蛋白溶液特性描述:
来源:人类血浆
纯度:纤维连接蛋白的纯度>95%,基于7% SDS-PAGE的考马斯亮蓝染色。
浓度:纤维连接蛋白的浓度为0.5 mg/ml,每1.0 mg纤维连接蛋白溶解在2.0 ml缓冲液中。
(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.
细胞附着活性:24孔板在PBS中(每孔0.3毫升)中涂覆纤维连接蛋白,于37°C孵育过夜。经BSA阻断后,TIG-3细胞(JCRB 0506)(每孔5 X 104细胞/1 ml DMEM)被加入,并在37°C孵育90分钟。附着的细胞通过库仑计数器进行计数。
pH:纤维连接蛋白溶解在pH约为7的缓冲液中。
储存:建议将纤维连接蛋白存放在-20°C以下,并避免重复冻结和解冻。
人纤维连接蛋白溶液使用说明:
请按照以下建议作为指南,确定您培养系统的合适的涂层条件。
1. 解冻纤维连接蛋白,并使用无血清培养基或PBS(不含Ca++,Mg++)稀释至所需浓度。最终溶液应该足够稀释,使添加的体积能够均匀覆盖表面。
2. 向培养表面添加适量稀释后的材料。
3. 在室温孵育约1小时。
4. 吸去剩余材料。
5. 用双蒸馏水仔细冲洗培养皿,避免刮伤底部表面。
6. 培养皿已经可以使用。如果保持无菌性,它们也可以在2-8°C潮湿存放或风干。
注意事项:用于生产本产品的人源原料已经检测为乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)和2型(HIV-2)以及梅毒均为阴性。请像处理潜在传染源一样小心处理。
艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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