Advanced BioMatrix 胶原酶，冻干粉使用指南&应用领域

胶原酶是一种能够分解动物组织中的原生胶原蛋白的酶类。胶原酶包含一系列酶活性，包括胶原酶、酪蛋白酶、肉毒杆菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解胶原蛋白并分离组织。这些酶由多种微生物和许多不同的动物细胞制造。强效的胶原酶是厌氧细菌产生的肉毒杆菌组织溶解素。细菌胶原酶是一种含有胶原酶的粗制复合物，更准确地称为肉毒杆菌肽酶A，这是一种对脯氨酸-甘氨酸键（Pro-X-Gly-Pro序列中的X）具有特异性的蛋白酶，其中X最常是中性氨基酸。这些序列在胶原蛋白中经常出现，但在其他蛋白质中很少见。尽管许多蛋白酶可以水解单链变性的胶原多肽，但肉毒杆菌肽酶A在蛋白酶中独特之处在于它能够攻击和降解结缔组织中常见的三股螺旋原生胶原纤维。真正的胶原酶可以同时跨越所有三个链条进行切割，或者在单股上进行攻击。哺乳动物胶原酶在特定位点将胶原在其原生三股螺旋构象下分裂，产生代表原胶原分子3/4和1/4长度的片段TC A和TC B。碎片化后，这些片段会展开成随机多肽，并更容易受到其他蛋白酶的攻击。

艾美捷胶原酶，冻干粉，50 毫克#ABM-5030-50MG应用领域：

胶原酶作为胶原凝胶的解离试剂提供。各种胶原酶产品已经专门评估用于与Advanced BioMatrix的胶原产品一起使用。该产品旨在提高从胶原凝胶中分离的细胞的存活能力和功能性。

胶原酶以50毫克包装大小的冻干、无菌粉末形式提供。重新溶解后，产品即可使用。

胶原酶作为供应的产品不适用于人体使用

胶原酶，冻干粉特性：

来源：来自Clostridium histolyticum

形式：冻干粉末

酶活性：单位干重 > 125 U/mg，酪蛋白酶 > 200 U/mg，肉毒杆菌蛋白酶 < 4 U/mg，胰蛋白酶 < 0.5 U/mg

胶原酶单位定义：1单位在37°C、pH 7.5条件下，在5小时内从胶原中释放出一个微摩尔的L-亮氨酸当量

包装大小：50毫克

灭菌：0.22微米过滤

无菌性：无生长

存储：建议将胶原酶冻干粉末存储在2-10°C。重新溶解后，产品在2到10°C稳定，可保存长达5天。

胶原酶，冻干粉使用说明：

请按照以下建议作为指南，确定最佳的凝胶解离程序适用于您的培养系统。

1. 在磷酸盐缓冲盐水或其他pH中性介质中重新溶解冻干胶原酶粉末（50毫克）。可以使用典型浓度1毫克/毫升。

2. 吸除胶原凝胶中的培养基。

3. 用预热的PBS或其他pH中性介质洗涤胶原凝胶2次，以去除可能抑制胶原降解的培养基。

4. 加入适量的胶原酶溶液（一个凝胶体积应该足够）。例如：对于含有0.5毫升凝胶的24孔板，加入0.5毫升胶原酶溶液。

5. 转移到37°C孵育箱中，孵育30-60分钟。为了促进胶原凝胶更快地解离，可以使用大口径移液吸头上下吸移凝胶和胶原酶溶液。

6. 如有必要，再孵育30-60分钟，以完成凝胶的消化。如果需要，每15分钟移液搅拌凝胶/细胞混合物。注意：更厚的凝胶或含有更高细胞浓度的凝胶可能需要更多时间。

7. 一旦凝胶完全消化，向凝胶/细胞混合物中加入等量的完整培养基，然后收集细胞。冲洗培养容器，收集任何残留细胞。

8. 将细胞悬浮液在室温下以250 x g离心5分钟。

9. 小心吸除上清液，并将细胞沉淀悬浮在0.5-1毫升新鲜培养基中。

10. 使用血细胞计数板和尝试蓝染色液确定细胞计数和存活率。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。