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TeloCol-3,牛胶原蛋白溶液--一种高度纯化的无氨酸胶原蛋白溶液

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-02-18     
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Advanced BioMatrix TeloCol-3,牛胶原蛋白溶液是一种高度纯化的无氨酸胶原蛋白溶液,浓度约为3 mg/mL,pH值为2,经过无菌过滤。TeloCol?-3约为97%的I型胶原蛋白,其余部分为III型胶原蛋白。TeloCol?胶原蛋白的纯度≥99%。SDS-PAGE电泳显示出胶原蛋白的典型α、β和γ带状图案。实际胶原蛋白浓度已印在产品标签和每个特定批次的分析证书上。TeloCol?-3是通过酸提取过程获得的,保持了具有端肽的胶原链两端的前肽区域,即N-端和C-端肽区域。

 

I型胶原蛋白是皮肤、骨骼、肌腱和其他纤维结缔组织的主要结构组分,与其他胶原蛋白不同之处在于其低赖氨酸羟基化和低碳水化合物组成。尽管已经确定了多种类型的胶原蛋白,但所有类型均由三肽链分子组成,这些链以三螺旋构象排列。主要结构(氨基酸序列)的轻微差异决定了不同类型之间的差异。主要结构的氨基酸序列主要是一个重复的基序,其中每三个位置都有甘氨酸,前面经常是脯氨酸或4-羟脯氨酸。I型胶原蛋白是由两条α1(I)链和一条α2(I)链组成的异源三聚体,在中性pH值和37°C时会自发形成三螺旋支架。

 

多细胞生物体内的细胞生长、分化和凋亡取决于细胞与细胞外基质(ECM)的粘附。鉴于I型胶原蛋白是ECM的丰富组分,培养在三维(3D)胶原凝胶中的细胞比传统的二维系统更好地模拟体内细胞环境。已经证明对多种细胞类型有效,包括心脏和角膜成纤维细胞、肝星状细胞(HSCs)和神经母细胞瘤细胞等。

 

许多疾病可能影响ECM的机械性能,而其他疾病状态可能是由于ECM的密度或刚度变化引起的。由于I型胶原蛋白是ECM抗张性能的关键决定因素,3D胶原凝胶在机械传导研究中非常有用,涉及将机械信号转化为生化信号的细胞信号传导。3D凝胶允许研究ECM的机械性能(如密度和刚度)对细胞发育、迁移和形态的影响。与2D系统不同,3D环境使细胞伸展能够同时与所有细胞表面的整合素相互作用,从而激活特定的信号通路。凝胶的硬度或刚度也会在3D与2D环境中对细胞迁移产生不同影响。此外,由于在3D系统中细胞伸展与基质纤维的交织可能会导致整合素无关的机械相互作用,在2D系统中,细胞附着在平坦表面上,这种情况是不可能发生的。

 

细胞表面受体识别胶原三螺旋,不同类型的胶原亚型被一群结构和功能多样的细胞表面受体识别。最知名的胶原受体是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌细胞上的主要整合素,而α2β1是上皮细胞和血小板上的主要形式。这两种形式在许多细胞类型上表达,包括成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、软骨细胞和淋巴细胞。某些细胞类型还可能表达其他胶原受体,如介导血小板粘附和信号传导的糖蛋白VI(GPVI)。其他胶原受体包括圆盘结构域受体、白细胞相关IG样受体-1以及甘露糖受体家族的成员。

 

该产品是由从牛皮中提取的胶原蛋白制备而成,含有高单体含量。起始材料来自封闭牧场,并使用符合cGMP的制造工艺进行纯化。该过程包含内置的、经过验证的步骤,以确保可能的朊原体和/或病毒污染物的灭活。

 

Advanced BioMatrix

 

艾美捷TeloCol-3,牛胶原蛋白溶液(ABM-5026-1KIT)储存/稳定性:

储存在2-10°C,并在冷冻胶冰包上发货。不要冷冻。每个特定批次的产品标签和分析证书上列有过期日期。只有在按照指示处理和储存产品时,过期日期才适用。

 

注意事项和免责声明:本品仅供研发使用,不适用于人类或其他用途。请参阅材料安全数据表以获取有关危害和安全操作规范的信息。

 

TeloCol-3,牛胶原蛋白溶液涂层程序:

注意:采用无菌操作规范以保持产品在准备和处理过程中的无菌性。

1. 如有需要,将所需体积的TeloCol?-3胶原蛋白溶液从瓶中转移至稀释容器。使用无菌0.01 N HCl溶液进一步稀释至所需浓度。典型的工作浓度可能在50至100微克/毫升之间。

注意:使用这些建议作为指导,确定您培养系统的最佳涂层条件。

2. 轻轻旋转混合物,直至完全混合。

3. 添加适量稀释后的TeloCol?-3物质至培养表面,确保整个表面都被涂覆。

4. 在室温下盖上,孵育1-2小时。吸去任何剩余物质。或者在室温下孵育,直至表面干燥。

5. 孵育后,吸去任何剩余物质。

6. 小心用无菌培养基或PBS仔细冲洗涂层表面,避免划伤表面。

7. 涂层表面已准备就绪。如果保持无菌性,它们也可以在2-8°C潮湿或风干保存。


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