即用型VitroCol，人去端胶原溶液涂层程序说明

VitroCol，人去端胶原溶液是一种 3 mg/ml I 型人去端胶原溶液，用于 2D 和 3D 细胞培养，或作为胶原蛋白标准品。 VitroCol 胶原蛋白由人类新生儿成纤维细胞自然分泌，然后经过加工和纯化，产生天然产生的人类胶原蛋白。 VitroCol 设定了纯度标准（胶原蛋白含量 >99%）。 VitroCol 大约 97% 为 I 型人类胶原蛋白，其余为 III 型胶原蛋白。每个特定批次的浓度均在购买每个产品时提供的分析证书上提供。 VitroCol 是可溶于 0.01 N HCl 的去端肽胶原，因此 pH 值为 2。当涂覆表面、提供培养细胞薄层制剂或用作固体凝胶时，VitroCol 特别适合人类细胞培养系统。 VitroCol 人类胶原蛋白采用用户友好的包装提供，以便使用和储存。 VitroCol 经过无菌过滤，以即用型溶液形式提供。

艾美捷VitroCol，人去端胶原溶液（ABM-5007-20ML）储存/稳定性：

存放在2-10摄氏度，并在冷冻胶冻包装中发货。不要冷冻。产品标签和每个特定批次的分析证书上列有过期日期。当产品按照指示进行处理和存储时，过期日期有效。注意事项和免责声明本品仅供研发使用，不适用于人类或其他用途。请查阅有关危害和安全操作规程的材料安全数据表。

涂层程序说明：请将以下建议作为指导，以确定您培养系统的合适涂层条件。

1. 从瓶中取出所需量的胶原蛋白，放入稀释容器中。

2. 将VitroCol?稀释至约50至100 ?g/ml（约1:30）的水中。也可以使用0.01N盐酸溶液。

3. 轻轻搅拌混合物，直到完全混合。

4. 向培养表面添加适量稀释后的VitroCol?材料，确保整个表面都被涂层。

5. 在室温下盖好，孵育1-2小时。吸去任何剩余材料。或者，保持在室温下，直到表面干燥。

6. 孵育后，吸去任何剩余材料。

7. 用无菌培养基或PBS仔细冲洗涂层表面，避免划伤表面。

8. 涂层表面已经可以使用。如果保持无菌状态，也可以在2-8°C潮湿或风干保存。

3D凝胶制备程序：

1. 缓慢地将冷却的10倍PBS或10倍培养基的1份加入到冷却的胶原溶液的8份中，轻轻搅拌。

2. 使用无菌0.1M氢氧化钠将混合物的pH调整至7.0-7.5。仔细监控pH调整（pH计、酚红或pH试纸）。

3. 使用无菌水将最终体积调整为10份。

4. 为防止凝胶化，保持混合物的温度在2-10°C。

5. 要形成凝胶，加热至37°C。等待90至120分钟使凝胶形成。

VitroCol，人去端胶原溶液部分文献参考：

1. Grinnell, F., Fibroblast biology in three-dimensional collagen matrices. Trends Cell Biol., 13, 264-269 (2003).

2. Beningo, K.A., et al., Responses of fibroblasts to anchorage of dorsal extracellular matrix receptors. Proc. Natl. Acad Sci. USA, 101, 18024-18029 (2004).

3. Zaman, M.H., et al., Migration of tumor cells in 3D matrices is governed by matrix stiffness along with cell-matrix adhesion and proteolysis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103, 10889-10894 (2006).

4. Jiang, H., and Grinnell, F., Cell-matrix entanglement and mechanical anchorage of fibroblasts in three-dimensional collagen matrices. Mol. Biol. Cell, 16, 5070-5076 (2005).

5. Heino, J., The collagen receptor integrins have distinct ligand recognition and signaling functions. Matrix Biol., 19, 319-323 (2000).

6. Heino, J., The collagen family members as cell adhesion proteins. BioEssays, 29, 1001-1010 (2007).

7. Ivaska, J., et al., Cell adhesion to collagen-is one collagen receptor different from another? Conn. Tiss., 30, 273-283 (1998).