新品 “种子”A53T突变型α-突触核蛋白，建模快人一步

发布者：艾美捷科技发布时间：2019-03-20

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α-突触核蛋白与帕金森氏症的病因与疾病发展有着密切的联系。帕金森氏症 (PD) 是一种神经衰退疾病，该疾病患者的大脑中可见α-突触核蛋白聚集形成路易体。α-突触核蛋白是由SNCA基因表达的一种分子量为 14-kDa 的蛋白。

目前已知的α-突触核蛋白的自然状态可有很多种：可能是没有折叠的单体¹、折叠的四聚体、或者是处于和其他寡聚体动态共存的形式²。在帕金森疾病中，这些分子量小的α-突触核蛋白会聚集形成原纤维、纤维以及路易体，从而导致神经元的病变和死亡。

也有其他研究表明寡聚体和原纤维具有神经毒性^3-6而路易小体可能有神经保护功能⁷。StressMarq的活性聚集体具有催化突触核蛋白单体聚集形成活性聚集体的作用，我们称之为“种子”，从而能够在人为控制条件下模拟帕金森等发病时神经纤维聚集沉降的过程，对于研究退行性神经疾病（如帕金森等）有着非常重要的意义。

α-突触核蛋白结构：

α-突触核蛋白结构

α-突触核蛋白由三个主要区域：羧基末端区域、NAC区域、以及氨基末端区域构成。A53T 突变位于氨基末端区域。

突变型突触核蛋白

A53T突变型α-突触核蛋白特点：

A53T 是错义点突变, 也就是导致了氨基酸的改变：第53 个氨基酸由丙氨酸突变为苏氨酸。该突变是由于SNCA基因 209位置的鸟嘌呤变成了腺嘌呤 (G209A)⁸。A53T 突变与一种常染色体显性遗传的早发型 PD 相关，这种 PD 最先发现于意大利和希腊裔家族⁸，也见于一个韩国裔家族⁹，A53T 变异导致该疾病的发病年龄比较早⁸。虽然大部分的 PD 病例是散发型的，并非遗传病，而且也不涉及 A53T 突变, 但是研究 A53T 突变可以帮助科研学者们更好的了解α-突触核蛋白的聚集和发展机制，从而研发出更好的疾病模型和治疗方案。

α-突触核蛋白

丙氨酸和苏氨酸有相似的结构，但是α-突触核蛋白中的丙氨酸替换成苏氨酸对α突触核蛋白的纤维原聚

A53T突变型α-突触核蛋白优势：

A53T 变异只涉及到单一氨基酸改变，而且丙氨酸和苏氨酸结构上非常相近，那么为什么A53T突变型有这么强的聚集效果呢？这是因为A53T 和其他致病突变都发生在α-突触核蛋白的氨基末端，理论模型显示 A53T 突变会使α-突触核蛋白的 NAC 区域和氨基或羧基区域的长程相互作用消失，导致 beta折叠的加速形成¹³。NMR 测量数据显示 A53T 突变可以延长并稳定在寡聚化和纤维化中起着重要作用的 beta折叠结构¹⁴。因此A53T 突变型能够更快聚集alpha突触核蛋白，有更明显的致病效果。

下面的硫黄素T检测曲线可以明显看出A53T突变型的聚集效果明显强于非突变型α-突触核蛋白。

硫黄素 T 是一种荧光染料, 可以绑定富含beta折叠的结构, 例如α-Syn聚合体. 绑定之后, 硫黄素T光谱会发生红移, 荧光强度会增强. A53T α-Syn蛋白单体 (SPR-325)的硫黄素 T 发射光曲线显示了有限的荧光强度增强 (相关于α-Syn蛋白聚合体). 而 10 nM活性α-Syn聚合体 (SPR-326) 与100 μm 活性α-Syn单体 (SPR-325) 混合时荧光强度明显增强, 这是由于聚合体催化了活性单体形成更多聚集体PFFs.

活性突触核蛋白 (α-Syn) 聚合体 (SPR-322) 催化活性单体(SPR-321)形成新的聚合体. 硫黄素 T 是一种荧光染料, 可以绑定富含beta折叠的结构, 例如α-Syn聚合体. 绑定之后, 硫黄素T光谱会发生红移, 荧光强度会增强. 左侧硫黄素 T 发射光曲线展示了四种试验对象随时间增强的荧光强度(相关于α-Syn蛋白聚合体),其中 10 nM活性α-Syn聚合体(SPR-322) 与100 μm 活性α-Syn单体 (SPR-321) 混合物荧光增强最明显, 另外几组对比分别是活性α-Syn聚合物 (SPR-322) 、活性α-Syn单体 (SPR-321) 以及Thioflavin T λex = 450 nm, λem = 485 nm.

下表为艾美捷科技为您推荐细胞应激和神经生物领域领导者StressMarq研发的，不同规格的A53T突变型α-突触核蛋白单体、聚集体：

货号	品名	规格
活性重组人 A53T 突变型 Alpha Synuclein蛋白单体(1 型)	SPR-325B	100 µg
	SPR-325C	2 x 100 µg
	SPR-325E	5 x 100 µg
活性重组人 A53T 突变型 Alpha Synuclein蛋白 PFFs (1 型)	SPR-326B	100 µg
	SPR-326C	2 x 100 µg
	SPR-326E	5 x 100 µg

参考文献：

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StressMarq公司的核心技术领域为细胞应激（尤其是热休克蛋白（HSP）领域，领先全球），离子通道，载体研究，同时在神经科学领域推出特有的具有生物活性的Tau蛋白与α-突触核蛋白。产品领域涉及到：细胞凋亡、细胞信号、通路和转运、细胞器标志物、热休克、神经生物学、神经科学、氧化应激、磷酸化运输等。StressMarq的优势在于提供四种独立的产品系列，分别涉及抗体、蛋白、酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒及小分子领域。

作为StressMarq在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的 StressMarq产品与服务。