Bertin Instruments/艾美捷典型的RCGRP（人）ELISA试剂盒检测原理&标曲参考

降钙素基因相关肽（CGRP）是一种强效的血管扩张剂，同时也引发多种其他生物效应。

在正常人群中，CGRP的平均血浆水平报告为0.8 pmol/L至71 pmol/L（3 pg/mL至269 pg/mL）。在进行血液透析、怀孕、哮喘加重以及髓样甲状腺癌病例中，观察到了循环CGRP水平的增加。

酶免疫测定（EIA）是一种检测和定量样本中抗原（蛋白质、激素等）或抗体的技术。它依赖于抗体结合特定抗原的能力。

艾美捷Bertin Instruments-RCGRP（人）ELISA试剂盒（A05481）检测原理：

酶联免疫分析（EIA/ELISA）基于一种夹心技术。提供的试剂盒孔板被涂覆有特异性单克隆抗体，以捕捉降钙素基因相关肽（CGRP）。引入孔板中的CGRP（标准品或样本）与涂覆在板上的单克隆抗体结合，然后通过特异性针对CGRP的乙酰胆碱酯酶（AChE）-Fab’偶联物进行检测。

这两种抗体通过结合在CGRP的不同表位上形成一个夹心结构。夹心结构固定在孔板上，剩余的试剂被洗去。CGRP的浓度通过测量固定标记物的酶活性来确定，使用Ellman试剂。AChE标记物与Ellman试剂反应生成一种在405 nm或414 nm处强烈吸收的黄色化合物。

颜色的强度通过分光光度法进行测定，与免疫反应过程中孔内存在的CGRP的量成正比。

所需材料和设备：

除了标准实验室设备外，还需要以下材料：

样本准备（并非所有样本类型都需要）：

C-18反相色谱柱或Oasis? HLB提取柱

甲醇

醋酸

检测所需：

精密微量移液器（20至1000 μL）

分光光度计读板仪（405 nm或414 nm滤光片）

微孔板洗涤机（或洗涤瓶）

摇床微孔板

多通道移液器及一次性吸头（30-300 ?L）

UltraPure水 #A07001.1L

聚丙烯管

用于制备所有ELISA试剂和缓冲液的水必须是UltraPure水（去离子水且不含有机污染物痕迹）。

请勿使用蒸馏水、HPLC级水或灭菌水。

典型的CGRP（人）标准曲线：

Bertin Instruments 典型的RCGRP（人）ELISA试剂盒参考文献：

1. Grassi J. & Pradelles Ph.Compounds labelled by the acetylcholinesterase of Electrophorus electricus. Its preparation process and its use as a tracer or marquer in enzymo-immunological determinations.

United States patent, N° 1,047,330. September 10, 1991

2. J. Grassi and P. Pradelles The use of Acetylcholinesterase as a Universal marker in Enzyme-Immunoassays

Proceedings of the Third International Meeting on Cholinesterases, American Chemical Society (1991)

3. Philippe Pradelles, Jacques Grassi, and Jacques Maclouf Enzyme Immunoassays of Eicosanoids Using

Acetylcholinesterase Methods in enzymology, vol. 187, p24, 1990

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