操作方法丨高浓度无酚红基质胶（体内实验PDX/CDX 异种移植）

高浓度无酚红基质胶（体内实验PDX/CDX 异种移植）分别有标准高浓度和低因子高浓度，它们的粘度较高，凝胶时间较快，更适合于体内实验（动物模型）常被应用于PDX/CDX模型建立、体内血管生成测定等。蛋白浓度：16-26 mg/mL。

基质胶是一种源自小鼠肉瘤细胞的细胞外基质构成的水凝胶，包含许多组织基底膜所有已知主要成分，包括层粘连蛋白 (~60%)、胶原蛋白 IV (~30%)、巢蛋白 (~8%) 和硫酸肝素蛋白多糖透明聚糖 (~2–3%)，以及生长因子等共计14000种多肽和1851种蛋白。

基质胶可以改善正常和转化的贴壁依赖性上皮细胞以及其它细胞类型的附着和分化，因此是使用最为广泛的细胞体外3D培养的支架，尤其是类器官培养。

物理性质：

可溶水凝胶，4℃为液态，37℃为半固体凝胶状态。液态（4℃）与半固体凝胶态（37℃）可以反复转换。

艾美捷Biogradetech高浓度无酚红基质胶（体内实验PDX/CDX 异种移植）

中文名称：高浓度，无酚红，基质胶（体内实验，PDX/CDX 异种移植）

英文名字：HC Basement Membrane Matrix, Phenol Red-free (For in vivo experiments, PDX and CDX)

Biogradetech货号：A-MGL26-5mL

规格：5mL

Biogradetech高浓度无酚红基质胶（体内实验PDX/CDX 异种移植）应用：

对细胞3D培养具有更好的支撑性，适用于体内实验，如体内成瘤，血管生成，肿瘤类器官培养，PDX建模等。

操作方法：

类器官培养、分化

1. 将分装后的基质胶置于碎冰盒中，并将其置于4℃冰箱过夜融化备用；

2. 实验开始前，将24孔培养板置于37℃培养箱中预热；

3. 将收集到的细胞悬液与溶解后的基质胶以体积比1：2的比例进行混合，并放置于冰盒之上；（此操作需在冰盒上进行，防止基质胶凝固）

4. 取出预热的24孔板，并使用预冷的枪头吸取50μL混合物，快速滴加在培养孔板中；

5. 将24孔板放置于培养箱中，静置5min，之后将孔板倒扣，静置25min；

6. 待基质胶凝固后，向24孔板中添加500μL的类器官培养基，并放置于培养箱中继续培养。

体外血管生成研究

1. 将96孔板放置于冰盒之上，取70-100μL基质胶加入到板孔中，轻轻震荡使其均匀铺满板底；

2. 将孔板置于37℃的细胞培养箱中使基质胶凝固；

3. 取200μL含有1×104个的HUVEC细胞添加到凝固的基质胶之上；

4. 将处理好的孔板放置于细胞培养箱内进行孵育；

5. 在之后的2-12h内不间断观察生成的血管样网络结构。

薄胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状；

2.将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50 μL/cm2生长面积的基质；

3. 在37℃放置30分钟，即可使用。

厚胶成胶方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状；

2. 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与基质胶混合，用移液枪头使其悬浮于基质中，加入浓度为150－200 μL/cm2生长面积的基质胶；

3. 在37℃放置30分钟，可成胶，可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

薄层包被方法：

1. 冻融后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状；

2. 根据使用需要，采用无血清培养基稀释基质胶，根据实验需要确定最佳包被浓度；

3. 将稀释的基质胶包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时；

4. 去除未结合的基质胶，用无血清培养基轻轻地冲洗。