血浆/血清,外泌体总RNA提取试剂盒-升级款基于自主研发的均质液体磁珠,可特异性捕获外泌体,而无需吸附杂质,实现外泌体总RNA的高纯度和高回收率操作、高纯度和高回收率,使其特别适合从血浆和血清。提取的外泌体RNA可用于逆转录、RT-PCR、RT-qPCR、RIP、NGS和其他研究应用。
艾美捷血浆/血清,外泌体总RNA提取试剂盒-升级款:
编号:A-EXO009
规格:50T
储存:4°C(12个月)
ExoMag外泌体磁珠加强版 5毫升 4°C
提取缓冲液 50毫升 4°C
溶液A 2 x 125毫升 4°C
DEPC处理水 1毫升 4°C
1.5毫升无核酸酶管 50支 室温
材料需自备但未提供:
高速冷冻离心机
平台摇床
1.5毫升离心管
磁力架
冰盒
氯仿、异丙醇、75%乙醇等
样本前处理:
1. 细胞去除:在4°C下,以300 g离心样本5分钟。将上清液转移到新的离心管中。
对于无细胞样本,可以跳过此步骤。
2. 细胞和细胞碎片去除:在4°C下,以2000 g离心样本10分钟。将上清液转移到新的离心管中。
3. 大颗粒去除:将第二步得到的上清液在4°C下,以14000 g离心30分钟。将上清液转移到新的离心管中。
外泌体富集:
1. 将100微升的ExoMag外泌体磁珠加强版转移到1.5毫升离心管中,并将其放置在磁力架上30秒。丢弃磁珠保护溶液。
2. 向上述ExoMag外泌体磁珠加强版中加入500微升的预处理样本(如果处理的样本体积小于500微升,只需使用溶液A将样本体积补足至500微升)。将管固定在平台摇床上,在室温下以17转/分钟的转速孵育30分钟。
在某些样本中,ExoMag外泌体磁珠加强版在与外泌体结合过程中可能会聚集在一起。然而,这种聚集不影响分离效率,因此您可以信心满满地继续使用它们。
3. 将上述离心管放置在磁力架上,静置30秒,然后丢弃上清液。
4. 加入1毫升溶液A,通过翻转管子混合,然后放置在磁力架上,静置30秒,然后丢弃上清液。
5. 再重复第四步两次,保留ExoMag外泌体磁珠加强版。
重要注意事项:
提取缓冲液中含有苯酚,苯酚具有毒性和腐蚀性。吸入、皮肤接触或吞食可能导致中毒、烧伤和其他身体伤害。使用时应穿戴实验室大衣、手套、护目镜和口罩等防护装备。如果不慎接触到眼睛,应立即用大量水冲洗并寻求医疗帮助。
RNA提取应在冰上进行。
穿戴实验室服装和一次性手套,以避免RNase污染。
采取措施防止RNA提取中使用的耗材受到RNase污染。应使用无RNase水配制溶液。
准备氯仿、异丙醇(新开封或专用于RNA提取)、75%乙醇(用DEPC处理水配制)和无RNase水。
RNA的半衰期相对较短,容易降解。建议提取后立即进行进一步实验。
为了您的安全和健康,在操作过程中穿戴实验室服装和一次性手套。
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