Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构;存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中;Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
本试剂盒基于自主研发的磁珠,可在不吸附杂质的情况下特异性捕获外泌体,实现外泌体分离的高纯度和高回收率。它具有操作简单、纯度高、回收率高的优点,特别适合于从血浆和血清中分离外泌体。隔离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流粒度分析、电子显微镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等等。
艾美捷血浆/血清外泌体提取试剂盒:
目录号:A-EXO006
尺寸:50T
储存:收到后,按照储存说明储存套件组件。保质期为12月。
血浆/血清外泌体提取试剂盒组成:
套件组件尺寸 规格(50T) 储存条件
ExoMag Exosome珠子 500 mg 4℃
洗脱缓冲液 5 mL 室温
溶液A 2x125 mL 4℃
样品预处理:
1. 细胞去除:将样品在4℃下以300 g的速度离心5分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。对于无细胞的样品,可以跳过这一步骤。
2. 细胞和细胞碎片去除:将样品在4℃下以2000 g的速度离心10分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。
3. 大颗粒物去除:将从步骤2获得的上清液在4℃下以14000 g的速度离心30分钟,将上清液转移到一个新的离心管中。
富集外泌体:
1. 取500 μL预处理后的样品(如果处理的样品体积低于500 μL,只需使用溶液A将样品体积补至500 μL),加入10 mg(±10%变异)的ExoMag外泌体磁珠到一个1.5 mL的离心管中。将离心管固定在平台摇床上,在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。
2. 将上述离心管放在磁分离架上,静置5秒钟,倒掉上清液。
3. 加入1 mL溶液A,通过倒置离心管混合,将其放在磁分离架上静置5秒钟,倒掉上清液。
4. 重复步骤3两次,保留ExoMag外泌体磁珠。
分离外泌体:
1. 向ExoMag外泌体磁珠中加入100 μL洗脱缓冲液,涡旋30秒钟。将离心管固定在平台摇床上,在室温下以17 rpm的速度孵育30分钟。
2. 将离心管放在磁分离架上,静置5秒钟,将上清液转移到一个新的1.5 mL离心管中。这个上清液中含有外泌体。
外泌体不应长时间存放在洗脱缓冲液中。如果需要长期存储,请使用超滤管(分子量截留率10 kDa)用PBS溶液替换洗脱缓冲液。
注意事项:
1、使用前请将外泌体抽提试剂(41202-A)充分混匀。
2、产品只针对血清/血浆样本,不适用其它体液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提;如果需要进行细胞上清外泌体分离,请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。
3、如果想要进一步纯化外泌体,可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Biogradetech生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的供应商:Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。
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