多聚甲醛溶液,也称为4%PFA(4% Paraformaldehyde),是一种常用的固定剂,用于固定生物样本中的细胞和组织,以保持其形态和结构。
多聚甲醛是由甲醛分子聚合而成的固体,通过在水中加热溶解,可以制备成4%PFA溶液。这种溶液在生物学研究中广泛应用于细胞培养、动物组织和器官的固定。
固定样本的过程中,4%PFA会与细胞和组织中的蛋白质发生交联反应,使其固定在原位。这样可以保持细胞和组织的形态、结构和某些生物分子的空间分布,为后续的实验和分析提供可靠的基础。
使用4%PFA固定样本时,一般的操作步骤如下:
1. 准备4%PFA溶液:将适量的多聚甲醛加入适量的缓冲液(如磷酸盐缓冲液)中,搅拌溶解,调节pH值。
2. 处理样本:将待固定的细胞或组织样本置于4%PFA溶液中,通常需要一定的固定时间,如15分钟至数小时,具体时间根据样本的大小和类型而定。
3. 清洗:将固定后的样本用PBS(磷酸盐缓冲液)或其他适当的缓冲液进行洗涤,以去除多余的固定剂。
4. 后续处理:根据实验需求,可以进行进一步的处理,如切片、染色、免疫标记等。
4%PFA固定的优点包括固定效果稳定、对细胞和组织结构的保护较好、操作相对简单等。然而,需要注意的是,4%PFA固定后的样本可能对某些抗体或染料的反应性有影响,因此,在具体的实验设计中需要综合考虑使用固定剂的选择。此外,固定过程中需要注意安全操作,避免接触和吸入多聚甲醛溶液,以防对人体造成伤害。
艾美捷多聚甲醛溶液(4%PFA)基本参数:
目录号:A-CSH467
规格:100mL, 500mL
储存:在2~8°C的黑暗中储存(12个月)
多聚甲醛溶液(4%PFA)注意事项:
1.如果该产品长期未使用,其中的醛基可能会氧化成酸,导致溶液pH值降低并影响固定效果。
2.所需的固定时间可能因不同的细胞或组织样本而异,应根据细胞或组织类型和组织块的大小。
3.尽管聚甲醛的作用温和,但它会使组织硬化,固定时间过长会导致组织脆性,使其在切片过程中容易断裂。因此固定时间一般不应超过24小时
4.聚甲醛可以在固定的细胞或组织样品中长期存在,即使用合适的洗涤液或水洗涤几个小时后,仍可能残留一些残留物。因此,如果后续的实验结果受到醛基的影响,则有必要尽可能地冲洗掉残留的聚甲醛。
5.醛基可以通过与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,这可能部分或完全掩盖某些抗原表位,防止其完全暴露。这可能导致假阴性染色并影响免疫组织化学结果。因此,当使用用4%聚甲醛固定的细胞或组织样本进行免疫组织化学检测时,有时需要在进行免疫染色或其他后续程序之前提取抗原。
6.本产品对人体有害。请小心处理,并采取适当的保护措施,避免直接接触身体或吸入。
7.本产品仅供专业人员用于科学研究目的,不得用于临床诊断或治疗、食品或药物用途,也不得存放在普通居民区。
8.为了您的安全和健康,在处理本产品时,请穿戴实验室服装和一次性口罩。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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