在狭义上,结缔组织是指它所包含的三种纤维:胶原纤维、网状纤维和弹性纤维,其中胶原纤维分布最广、含量最丰富。Masson三色染色被称为Masson染色法,是结缔组织染色最经典的方法之一,也是权威的以及胶原纤维染色的经典技术。术语“三色染色”通常是指对细胞进行染色细胞核,并选择性地显示胶原纤维和肌肉纤维。这种方法的染色原理与阴离子染料分子的大小和组织渗透性:较小的分子可以很容易地渗透致密和低渗透性组织,而较大的分子只能进入结构松散和高渗透性组织。然而,苯胺蓝分子量大,因此Masson染色后,肌肉纤维呈现红色,胶原蛋白纤维呈现绿色(浅绿色)或蓝色(苯胺蓝)。
艾美捷改良Masson三色染色液基本参数:
目录号:A-CSH274
规格:8×50mL
储存:在2~8°C的黑暗中储存(12个月)
程序:
1.将组织固定在10%福尔马林固定剂中,然后常规脱水和包埋。切片被切割成4μm的厚度,然后进行常规的脱蜡直至脱水。
2.将切片置于Bouin溶液中,在室温下孵育过夜或置于37°C的培养箱中孵育2小时进行媒介化。然后,用自来水冲洗切片,直到切片上的黄色消失。
3.切片用天青石蓝染色溶液染色2-3分钟,然后进行短暂的水洗。
4.切片用Mayer苏木精染色溶液染色2-3分钟,然后进行短暂的水洗。
5.切片在酸-醇分化溶液中分化几秒钟,然后用水冲洗10分钟
6.切片用胭脂红染色液染色10分钟,然后用蒸馏水漂洗。
7.将切片用磷钼酸水合物溶液处理约10分钟。
8.倒出上清液,在不用水冲洗的情况下,将切片直接用苯胺蓝染色溶液染色5分钟。
9.将切片用弱酸溶液处理2分钟。
10.使用95%乙醇进行快速脱水。切片在100%乙醇中脱水三次,每次5-10秒。
11.切片在二甲苯中清洗三次,每次清洗1-2分钟。最后,使用中性安装介质进行密封
改良Masson三色染色液供应材料和储存条件:
注:
1.应尽可能彻底地对各部分进行除石蜡处理。酸性醇的分化时间应根据切片的厚度、组织类型及其年龄来确定。
2.磷钼酸的作用有两个:一方面,它将染红的胶原纤维区分为无色或淡红色,同时使肌肉纤维和纤维素仍呈现鲜红色;另一方面,它作为胶原纤维的媒染剂,促进它们与苯胺蓝染色溶液的结合。
3.苯胺蓝染色后用弱酸溶液处理,目的是去除细胞质中的蓝色,使染色生动清晰。对于用Zenker溶液固定的组织,弱酸溶液的处理时间可以延长到5分钟。
4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生动性。如果需要大量,可以制备0.1-0.3%的乙酸溶液作为替代品。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
Biogradetech生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的供应商:Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。
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