三色染色液是一种用于组织学研究中的染色试剂,常用于区分不同组织结构和细胞成分。常见的三色染色液包括H&E染色液、Masson三色染色液和PAS染色液。
Masson三色染色液:
酸性染色剂:染色胶原纤维,呈红色。
酸性红染色剂:染色肌纤维,呈红色。
天青染色剂:染色细胞核,呈蓝色。
Masson三色染色液主要用于观察和分析胶原纤维和肌纤维等结构的分布和形态。
改良Masson三色染色液是一种用于组织学研究中的重要染色试剂,用于区分胶原纤维、肌纤维和细胞核等结构。传统的Masson三色染色液包括酸性染色剂、酸性红染色剂和天青染色剂。
改良Masson三色染色液通过调整染色剂的配方和处理步骤,使得染色效果更加清晰和鲜艳,有助于观察和分析组织样本中的不同结构。这种改良方法可以根据实验需求进行调整,以获得合适的染色效果。
艾美捷改良Masson三色染色液(#A-CSH274)程序:
1.将组织固定在10%福尔马林固定剂中,然后常规脱水和包埋。切片被切割成4μm的厚度,然后进行常规的脱蜡直至脱水。
2.将切片置于Bouin溶液中,在室温下孵育过夜或置于37°C的培养箱中孵育2小时进行媒介化。然后,用自来水冲洗切片,直到切片上的黄色消失。
3.切片用天青石蓝染色溶液染色2-3分钟,然后进行短暂的水洗。
4.切片用Mayer苏木精染色溶液染色2-3分钟,然后进行短暂的水洗。
5.切片在酸-醇分化溶液中分化几秒钟,然后用水冲洗10分钟
6.切片用胭脂红染色液染色10分钟,然后用蒸馏水漂洗。
7.将切片用磷钼酸水合物溶液处理约10分钟。
8.倒出上清液,在不用水冲洗的情况下,将切片直接用苯胺蓝染色溶液染色5分钟。
9.将切片用弱酸溶液处理2分钟。
10.使用95%乙醇进行快速脱水。切片在100%乙醇中脱水三次,每次5-10秒。
11.切片在二甲苯中清洗三次,每次清洗1-2分钟。最后,使用中性安装介质进行密封
改良Masson三色染色液染色结果:
注:
1.应尽可能彻底地对各部分进行除石蜡处理。酸性醇的分化时间应根据切片的厚度、组织类型及其年龄来确定。
2.磷钼酸的作用有两个:一方面,它将染红的胶原纤维区分为无色或淡红色,同时使肌肉纤维和纤维素仍呈现鲜红色;另一方面,它作为胶原纤维的媒染剂,促进它们与苯胺蓝染色溶液的结合。
3.苯胺蓝染色后用弱酸溶液处理,目的是去除细胞质中的蓝色,使染色生动清晰。对于用Zenker溶液固定的组织,弱酸溶液的处理时间可以延长到5分钟。
4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生动性。如果需要大量,可以制备0.1-0.3%的乙酸溶液作为替代品。
该试剂仅用于科学研究领域,不适用于临床诊断或其他用途。
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