Chondrex阳离子牛血清白蛋白（cBSA）操作流程及注意事项

膜性肾病（MN）是一种由肾小球上皮下颗粒状免疫复合物沉积引起的疾病肾脏基底膜（GBM）。MN在人类中的发病机制尚不清楚；然而，据信它与其他疾病，如系统性红斑狼疮、肝炎和癌症。作为人类MN疾病模型，免疫复合物每天静脉注射2mg阳离子牛血清白蛋白（cBSA）可诱导大鼠肾小球肾炎（ICGN）持续4周（1）。带正电的cBSA已被证明能有效诱导ICGN，因为它能够穿透并结合在肾脏的GBM中发现的固定带负电荷的位点（2-4）。此外，通过注射cBSA建立的ICGN动物模型已经在狗、猫、兔子和小鼠中成功建立。

Chondrex 提供了用于在近交系Balb/c和远交系ICR小鼠中诱导ICGN的cBSA（Cat#9058）。小鼠尿白蛋白检测ELISA试剂盒（Cat#3012）是评估ICGN严重程度的最有效方法，因为ICGN的典型症状是蛋白尿。或者BPB蛋白检测试剂盒（目录号6026）用于评估蛋白尿，肌酐检测试剂盒蛋白尿或蛋白尿量。

艾美捷Chondrex阳离子牛血清白蛋白（cBSA）：

货号：9058

描述：化学修饰的阳离子牛血清白蛋白。

应用：用作免疫复合物诱导的肾小球肾炎（ICGN）在Balb/c和ICR小鼠中的免疫抗原。

数量：20 mg（0.05M磷酸盐缓冲盐水中2 mg/ml，10 ml）。

形式：溶液。

Chondrex阳离子牛血清白蛋白（cBSA）操作流程：

诱导小鼠ICGN的步骤：

动物选择：选择Balb/c和ICR小鼠（雄性或雌性，7-8周或更大）。对ICGN的敏感性可能因小鼠品系、动物供应商或实验室设施而异。

乳剂制备：使用2 mg/ml的阳离子BSA与等体积的完全弗洛因佐剂（Cat # 7008 - M. Tuberculosis，1 mg/ml）制成乳剂。

免疫接种：在小鼠尾部皮下注射0.1 ml乳剂（阳离子BSA：0.1 mg）。

肾炎诱导：在免疫接种后两周，静脉注射0.2 ml（400 ?g）阳离子BSA（2 mg/ml）溶液。每隔一天重复静脉注射，总共进行五次。

注意事项：

阳离子BSA的静脉注射可能导致过敏反应，这对小鼠可能致命。为避免此问题，使用缓慢静脉注射（1 ml/min）或降低阳离子BSA的剂量和浓度。将阳离子BSA用PBS稀释至适当浓度。第一次注射使用50-100 ?g（0.5-1 ml的0.1 mg/ml阳离子BSA），第二次至第五次注射使用400 ?g（1 ml的0.4 mg/ml阳离子BSA）。

肾炎评估：

通过测定在16小时尿液收集期间排泄的白蛋白量（白蛋白尿）来评估肾炎的严重程度。推荐使用Chondrex Inc.的鼠白蛋白检测ELISA试剂盒（Cat # 3012）。

存储：在-20°C黑暗处保存。

稳定性：可保存1年。

样本数据 – ICGN在ICR小鼠中的研究

1、研究使用了7-8周龄的ICR小鼠（雄性，Harlan，USA）。

2、在第0天，小鼠通过尾部皮下注射了100 ?g的cBSA，乳化剂为CFA（商品编号7008，结核分枝杆菌，浓度为1 mg/ml）。

3、在第14、16、18、20和22天，小鼠静脉注射了400 ?g（0.2 ml，浓度为2 mg/ml）的cBSA。

4、使用代谢笼在16小时的尿液收集期间评估尿蛋白。

在小鼠中，在16小时的尿液收集期内，白蛋白含量超过1毫克的白蛋白被认为是蛋白尿。小鼠#1537死亡在第14天第一次静脉注射cBSA后。小鼠#1536在第一次尿液采集后第24天死亡。小鼠#1535病情严重蛋白尿，在第32天达到峰值。

文献参考：

1. T. Yamamoto, I. Kihara, T. Morita, T. Oite, Bovine serum albumin (BSA) nephritis in rats. I. The Experimental Model. Acta Pathol Jpn 28, 859-66 (1978).

2. T. Yamamoto, S. Miyazaki, K. Kawasaki, E. Yaoita, I. Kihara, Rat Bovine Serum Albumin (BSA) Nephritis. VI. The Influence of Chemically Altered Antigen. Clin Exp Immunol 65, 51-6 (1986).

3. W. Border, E. Kamil, H. Ward, A. Cohen, Antigenic changes as a determinant of immune complex localization in the rat glomerulus. Lab Invest 45, 442-9 (1981)

4. T. Oite, S. Batsford, M. Mihatsch, H. Takamiya, A. Vogt, Quantitative Studies of in Situ Immune Complex Glomerulonephritis in the Rat Induced by Planted, Cationized Antigen. J Exp Med 155, 460-74 (1982).

Chondrex 致力于开发和生产高纯度胶原蛋白、抗胶原蛋白单克隆抗体和多种ELISA试剂盒等产品，为研究人员提供研究类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis ,RA)发病机制和筛选潜在治疗方法所需的工具。艾美捷科技是Chondrex的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。