猪胰腺α-淀粉酶(PPA)在内部键处作用于大型线性碳水化合物聚合物。水解产物具有α构型。α-淀粉酶活性存在于所有生物体中;然而,即使在单个物种的不同组织中,酶也存在显著差异。
特异性:
α-淀粉酶催化含有3个或更多α-1,4-糖苷键的多糖中内部α-1,4-葡萄糖苷键的水解,产生麦芽糖和葡萄糖的混合物。另见Takeshita和Hehre(1975年)。
组成:
该酶是一种糖蛋白(Beaupoil-Abadie等人1973年)。它由大约475个残基组成的单一多肽链,有两个自由巯基,四个二硫键,并且含有一个紧密结合的Ca2+(Granger等人1975年,Steer等人1974年)。它以两种形式存在(PPAI和PPAII),这两种形式具有相同的酶性质和55.4 kDa的分子量,仅在电泳迁移率和pI上有所不同(Cozzone等人1970b年,Marchis-Mouren和Pasero 1967年,Darnis等人1999年)。
PPA的两种形式的结构由一个主要的A域(残基1-99和170-404)组成,该域组织为一个(α/β)8桶,包含一个环(B域)。紧随其后的是C端域C(残基405-496),这是一个十β链的希腊钥匙图案(Darnis等人1999年)。
分子特征:
动物α-淀粉酶由两个位点编码,amy1(唾液)和amy2(胰腺)。完整的amy cDNA长度为1565 bp。它包含一个15个氨基酸的信号肽和一个1536-nt的开放阅读框(ORF)。一个29-nt的3'非编码区域后面是一个短的poly(A)尾。
动物α-淀粉酶包含五个保守区域,包括四个在(α/β)8桶周围或附近的区域,以及一个在域B的C端附近的短序列(Janecek 1993年,Svensson 1994年,Janecek和Balaz 1995年)。人和猪胰腺α-淀粉酶的同一性为87.1%,仅有64个氨基酸替换。小鼠和大鼠α-淀粉酶与猪α-淀粉酶的同一性为85.5%。氨基酸304-310在哺乳动物α-淀粉酶中是保守的,被认为涉及酶机制(Darnis等人1999年)。
应用:
乙醇生产
减少淀粉或糖原分子
艾美捷Worthingtonα-淀粉酶(9000-85-5)的特性:
CATH分类
类别:Alpha Beta;主要Alpha
架构:Alpha-Beta桶;三明治
拓扑:TIM桶;免疫球蛋白样
分子量:
51.0-54.0 kDa(Cozzone等人1970a年)
55.4 kDa(SDS-PAGE)(Alkazaz等人1996年)
最佳pH值:7.0
等电点:
PPAI:7.5(Ajandouz等人1995年)
PPAII:6.4(Ajandouz等人1995年)
消光系数:
133,870 cm-1 M-1(理论)
E1%, 280 = 26(Caldwell等人1952年)
激活剂:
氯离子是必需的。(另见O’Donnell等人1975年关于胆汁盐的影响)
钙和氯离子对稳定性是必要的。
抑制剂:
酚类化合物(Funke和Melzig 2005年)
植物提取物(Karthic等人2008年,Buonocore等人1985年)
尿素和其他酰胺试剂(Toralballa和Eitingon 1967年)
文献参考:
Agarwal, R. and Henkin, R.
Metal Binding Characteristics of Human Salivary and Porcine Pancreatic Amylase , J Biol Chem 262 , 2568 , 1987
Allen, P. and Whelan, W.
The Mechanism of Carbohydrase Action. 9. Hydrolysis of Salep Mannan by Preparations of Alpha-Amylase , Biochem J 88 , 69 , 1963
Aoshima, H. , Manabe, T. , Hiromi, K. and Hatano, H.
Effect of Photooxidation of Bacterial Liquefying alpha-Amylase Dependent on the Degree of Polymerization of Linear Substrates , Biochim Biophys Acta 341 , 497 , 1974
Babbar, I. , Powar, V. and Jagannathan, V.
Crystallization of alpha-Amylase from Bacillus subtilis , Biochim Biophys Acta 65 , 347 , 1962
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