LIVE Step?细胞检测系统专为高通量、均匀、灵敏的发光定量代谢活性活哺乳动物细胞而设计。它由一种即用型溶液组成,可一步裂解细胞并测量培养物中存在的ATP量。检测在>100000个悬浮细胞和>50000个贴壁细胞之间呈线性,R2值大于0.99。信号稳定时间超过5小时(T1/2>300分钟),允许实验灵活性。该产品与多种介质配方和酚红的存在相容,在多次冻融循环后稳定。
图1:ATP存在下的萤光素活性。
在Mg2+、O2和ATP存在下,从裂解的代谢活性细胞释放的荧光素会产生发光信号。产生的信号与裂解前培养物中存在的代谢活性活细胞的数量成正比。
货号:82648
同义词:细胞活性试剂盒、细胞活性测定、荧光素酶
未提供但需要的材料
与所使用的仪器兼容的透明底部白色多孔组织培养板
感兴趣的哺乳动物细胞培养
细胞培养基
旋转摇床
荧光素酶测定仪
ATP溶液(可选)
储存/稳定性:
如果按照说明储存材料,试剂在收到后6个月内将表现最佳。首次解冻后,分装储存于-20°C。试剂可以经受几次冻融循环而不影响功能,但建议尽可能避免冻融循环。
应用:
使用标准曲线,通过测定ATP水平来确定哺乳动物培养中代谢活跃、存活的细胞值。
运输温度:-80°C
禁忌症:
培养中有机溶剂或其他化合物的存在可能导致荧光素酶抑制并影响读数。
如果使用有机溶剂或其他化合物,建议先进行初步测试以确定化合物单独的影响。例如,准备一个反应包含LIVE-Step?细胞测定溶液、1 ?M ATP和用于准备化合物的稀释试剂,以及一个反应包含LIVE-Step?细胞测定溶液、1 ?M ATP和感兴趣的化合物在稀释试剂中的最大浓度。如果观察到信号减少,可能需要对化合物进行滴定,以评估无影响的值,或对每个测试浓度使用对照。
建议不要使用板的边缘孔,以避免可能影响信号的温度梯度。
在进行测定时使用无菌技术,避免在培养基中添加细胞外ATP,以避免ATP污染。
避免在储存过程中将试剂暴露于光线和过度热量。
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