ALPCOc肽(小鼠)ELISA试剂盒(ALP-80-CPTMS-E01),是一种夹心型免疫测定法。96孔微孔板涂有C肽特异性单克隆抗体。将标准品、对照品和样品加入到带有共轭物的微孔板孔中。然后将微孔板在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度孵育。第一次孵育完成后,用洗涤缓冲液洗涤细胞并吸干。加入TMB底物,在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后,加入终止溶液,用分光光度计在450nm处测量光密度(OD)。产生的颜色强度与样品中C肽的量成正比。
ALPCO小鼠C肽ELISA用于定量测定小鼠血清中的C肽。
艾美捷ALPCO-c肽(小鼠)ELISA试剂盒所需材料:
- 用于分配高达100微升的精密移液管(带一次性吸头)
- 用于分配高达100微升的可重复或多通道移液管
- 用于试剂配制的容量瓶和移液管
- 用于试剂配制的蒸馏水或去离子水
- 微孔板洗涤器或洗涤瓶
- 能够达到700-900转/分钟的微孔板振荡器
- 带有450纳米滤光片的微孔板阅读器
- 用于样本制备的涡旋混合器。
注意事项:
1. 试剂盒中包含的人类血液产品已针对HIV(人类免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)的存在进行了检测。这些病毒的检测方法不能保证病毒的绝对不存在;因此,所有试剂应被视为潜在的感染性物质。处理和处置应符合所有适当的国家和地方法规,以处理潜在的生物危害物质。
2. 所有来源于动物的材料均为BSE(牛海绵状脑病)阴性。然而,所有材料应远离反刍动物。
3. 避免与皮肤直接接触。
4. 本产品不适用于内服。
5. 使用本产品时,避免进食、饮水或吸烟。
6. 不要使用嘴来移液任何试剂。
7. 试剂盒中的试剂是特定批次的,不得替代。
8. 不要使用超过有效期的试剂。
9. 不建议对测试程序进行变动,可能会影响测试结果。
储存条件:
试剂盒应储存在2-8°C的条件下。试剂盒在盒子标签上的有效期之前是稳定的。
样本处理:
血清样本适用于本测定。不需要对样本进行稀释或处理。然而,如果样本的C肽浓度高于最高标准,应将样本稀释在零标准中,并重复分析。建议1)在使用前彻底涡旋每个样本,2)在不停顿的情况下进行移液操作。将C肽样本分装后存放在≤-20°C的条件下。样本可以经历多达4次冻融循环。
结果计算:
从标准品构建标准曲线。将零标准作为曲线的一部分进行绘制。建议使用软件程序来计算标准曲线并确定样本的浓度。小鼠C肽ELISA是一种配体结合测定,其反应与分析物浓度呈S形关系。目前公认的此类曲线的参考模型使用5参数逻辑(pl)拟合,因为这些模型能在更大范围内优化准确性和精确度。尽管三次样条和其他模型是可接受的方法,但它们通常在检测范围的低值和高值端显示出较低的测定内准确性和精确度。在下面的例子中,使用了5参数pl曲线拟合来最大化低浓度样本的准确性和精确度。然而,由于个别实验室条件的影响,所有模型在可检测范围的最低和最高端的准确性和精确度都是有限的。因此,在解释分析物响应变得非线性时的结果时,应始终谨慎。
短期测定方案:
文献参考:
1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
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