Cayman的Caspase-3/7细胞活性检测试剂盒提供了一种方便的方法来检测细胞裂解物中caspase-3和caspase-7的活性。使用caspase-3/7特异性底物N-Ac-DEVD-AFC监测活性。活性酶的裂解作用会产生一种高荧光产物,可以使用400纳米的激发波长和505纳米的发射波长进行测量。试剂盒中包含活性caspase-3作为阳性对照,还含有诱导细胞凋亡的staurosporine。caspase-3/7抑制剂N-Ac-DEVD-CHO作为对照,以确认荧光信号对酶活性的特异性。
需要但未提供的:请下载试剂盒手册,以验证是否需要超纯水(Milli-Q或等效物)或其他任何组分进行此检测。
警告:本产品不适用于人类或兽医用途。
艾美捷Cayman Chemical血清铁测定试剂盒:
货号:702790
同义词:Apopain、Apoptotic Protease Mch-3、CASP-3/7、CMH-1、Cysteine Protease CPP32、ICE-LAP3、ICE-like Apoptotic Protease 3、Protein Yama、SCA-1、SREBP Cleavage Activity 1
发射:505纳米
激发:400纳米
储存:-80°C
运输:在美国本土使用干冰运输;其他地区可能有所不同
稳定性:≥ 1年
执行检测:
最佳的种植密度将取决于细胞类型和处理时间。过度拥挤的细胞可能导致高非特异性荧光。建议对所有测试化合物包括可选的用Staurosporine凋亡诱导剂处理,都包含适当的对照组。
1. 在96孔板中培养细胞,并按照典型的实验程序用测试化合物和对照组进行处理。每种处理都要进行六次重复,其中三个结果的细胞裂解物将被加入到样本孔中,另外三个加入到样本+抑制剂孔中。
a. 建议在实验中使用前,将贴壁细胞培养至80%的密度。
b. 建议在实验中使用前,将悬浮细胞的密度培养至5x10?至5x10?。
2. 以800 x g的速度离心板5分钟,并小心地吸去培养基。
3. 用200μl/孔的基于细胞的检测缓冲液轻轻洗涤细胞。
4. 以800 x g的速度离心板5分钟,并小心地吸去缓冲液。
5. 向每个孔中加入100μl的基于细胞的检测裂解缓冲液。
6. 在室温下,用轨道摇床轻轻摇晃孵育30分钟。
性能特征分析:
文献参考:
1.Cohen,G.M.Caspases:The executioners ofapoptosis.Biochem.J.326(Pt 1),
1-16(2007).
2.Mcllwain,D.R,Berger,T,and Mak,TW.Caspase functions in cell death anddisease.Cold Spring Harb.Perspect.Biol.5(4),a008656(2013).
3.Sun,G.Death and survival from executioner caspase activation.Semin.CellDev.Biol.156,66-73(2024).
4.Sahoo,G.,Samal,D.,Khandayataray,P,et al.A review on caspases:Keyregulators of biological activities and apoptosis.Mol.Neurobiol.60(10),5805-5837(2023).
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