Alpha Diagnostic International（ADI）小鼠 IgG ELISA 试剂盒，96 次检测，定量检测方案

IgG亚类定量抗小鼠IgG捕获和检测抗体已被选定用于平衡识别小鼠IgG的所有亚类，包括IgG3和IgG2c（这是小鼠品系C57Bl/6、C57Bl/10、SJL、NOD中的IgGa类似物）。虽然这提供了血清和其他样本中多克隆IgG的最准确定量所有小鼠品系的生物液体，该测定也适用于准确单克隆抗体的定量，其中存在显著的独特型（个体）和同种异型（菌株）反应性差异通常会产生与标准曲线和某些亚类（尤其是IgG3和IgG2c）在具有非平衡亚类识别的IgG测定中。

下图描述了不同IgG单克隆抗体的稀释液亚类，其浓度由纯化制剂的A280值指定。所有稀释曲线基本上与标准曲线平行，标准曲线包含总多克隆IgG，由正常成年人的不同菌株池制备老鼠。

作为Alpha Diagnostic International（ADI）在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International（ADI）热销产品小鼠 IgG ELISA 试剂盒，96 次检测，定量。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

小鼠 IgG ELISA 试剂盒，96 次检测，定量检测原理：

该试剂盒基于样品中小鼠IgG与两种抗体的结合，一种固定在微孔板孔上，另一种与辣根过氧化物酶（HRP）酶偶联。经过洗涤步骤后，添加显色底物，并通过HRP在TMB底物上的酶促反应产生颜色，该颜色与样品中IgG的含量直接成比例。添加终止液以终止反应，然后使用ELISA微孔板读数器在450nm处测量吸光度。样品和对照中IgG的浓度是根据含有已知浓度IgG的标准曲线计算得出的。

储存和稳定性

如果未开封，微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定，直至标签上打印的有效期。工作溶液的稳定性在试剂准备下指示。

标本收集和处理

通过静脉采血，允许凝血，并在室温下通过离心分离血清。不要加热灭活血清。如果血清不立即检测，可冷藏保存最多2周，或冷冻长期保存。避免冻融循环。

尚未研究使用血浆，但应该是适合检测的样本。

注意事项和安全指南

标准品、对照品、样品稀释液和抗小鼠IgG-HRP含有Proclin 300（0.05%，v/v）。终止液含有1%硫酸。请遵循良好的实验室操作规范，避免任何试剂与皮肤、眼睛或粘膜接触。所有试剂都可以用大量水冲入下水道。

如果尚未存档，可以从ADI网站请求或获得TMB、硫酸和Proclin 300的MSDS。

质量控制

试剂 准确和可重复的检测结果依赖于适当的存储、处理和控制试剂和样本温度。按照指示存储所有试剂，并只将用于检测的试剂预热至室温。关键试剂和样本的保质期会因长时间暴露在非冷藏条件下而缩短，导致检测结果不准确。所有溶液应清澈。浑浊或有颗粒物是试剂污染或不稳定的迹象，可能会干扰检测的正常进行。如有此情况，请勿使用。

样本对照品 试剂盒中提供了一个阳性血清对照品，并赋予了IgG浓度值范围。在此范围内的恢复是检测性能良好的指标。每个实验室还应检测内部对照样本，这些样本代表实验室预期的样本人群并且保持稳定。也应该运行一个样品稀释液阴性对照。

标准曲线 标准品产生的信号应该从最低标准到最高标准连续增加OD，差异大于1.2 OD。不连续增加或低信号可能表明技术、协议指导和/或试剂准备、使用或稳定性存在问题。阴性稀释对照的信号应低于最低标准。不要依赖于存在这些问题的检测产生的结果。

检测程序

将所有试剂预热至室温（18-30摄氏度）平衡（至少30分钟）。

稀释 在工作样品稀释液中稀释血清样本。对于大多数正常的小鼠血清，大约40到100k倍的稀释是适当的。为了准确性，推荐进行三个稀释步骤，如下：

1) 10ul血清 + 390ul稀释液 = [1:40]，

2) 20ul [1:40] + 980ul稀释液 = [1:2k]，

3) 20ul [1:2k] + 980ul稀释液 = 1:100k。

Alpha Diagnostic International（ADI）公司于1993年成立， 是一家美国私营生物技术公司，总部位于德克萨斯州圣安东尼奥，具有USDA认证的动物试验设施。公司致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒，用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。同时，还提供多肽合成定制服务和多抗产品以及其他抗体相关服务，例如纯化亲和素，酶耦联物，染料，荧光染料等。ADI旨在准确了解科学研究人员和诊断测试界的需求，并迅速提供有效的解决方案，成为科学界值得信赖的创新试剂和解决方案提供商。

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