天然AAV1-AAV9、AAVrh10、AAVDJ衣壳(1E+09-1E+10衣壳)和变性AAV8衣壳(1E+09-1E+10衣帽,在样品缓冲液中于95°C变性10分钟)的斑点印迹分析。
在室温下,用PBST(PBS+0.1%吐温20)中的5%干乳将硝化纤维膜封闭1小时。将抗AAV8(完整颗粒)小鼠单克隆抗体ADK8在封闭缓冲液(抗体浓度100 ng/ml)中稀释,并在室温下孵育1小时。羊抗小鼠IgG-HRP的第二抗体也在封闭缓冲区(抗体浓度200 ng/ml)中溶解,并在RT下孵育一小时。使用Pierce?ECL Plus Western Blotting Substrate通过化学发光检测可见条带。
用于表征感染的不同阶段,对AAV组装过程的分析非常有用。ADK8与AAV1、AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80、空衣壳和全衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位。预测的结合位点:残基586-LQQQNT-591(Gurda等人,2012)。该抗体不能用于使用变性条件的免疫印迹。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体 | PRO-610160 | 查看 |
抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体:
数量10 微克
抗体类型 单克隆
宿主 小鼠
亚型 IgG2a kappa
偶联物 未偶联
应用 斑点印迹、ELISA、ICC/IF、IP、中和试验
纯化 亲和色谱
反应性 AAV3, AAV7, AAV8, AAVrh10, AAVrh74, Anc80
无反应性 AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV6, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ
重悬前储存 直至标示的有效期前,储存于2-8°C
重悬后储存 可在2-8°C下储存长达3个月;长期储存需分装于-20°C;避免冻融循环
用途 仅供研究使用
克隆号 ADK8
免疫原 AAV8衣壳
浓度 用200微升PBS重悬后浓度为50微克/毫升
配方 冻干;用200微升无菌PBS重悬
结合亲和力
KD值 (AAV8) = <1.0E-12 M
KD值 (AAVrh10) = <1.0E-12 M
KD值 (AAVrh74) = <1.0E-12 M
同义词 腺相关病毒8,AAV-8
测试应用 测试稀释度
免疫细胞化学(ICC)/ 免疫荧光(IF) 依据检测而定
斑点印迹 1:100-1:500 (0.1-0.5 微克/毫升;非变性条件)
酶联免疫吸附试验(ELISA) 依据检测而定
免疫沉淀(IP) 依据检测而定
中和试验 EC50 ~14 微克/毫升(AAV3),~4 微克/毫升(AAV8) - 依据检测而定
抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体特点:
纯化、冻干
小鼠单克隆抗体
适用于斑点印迹、ELISA和中和
与AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80完整颗粒反应
同种型:IgG2aκ
文献参考:
Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).
Haar, J., Blazevic, D., Strobel, B., Kreuz, S. & Michelfelder, S. MSD-based assays facilitate a rapid and quantitative serostatus profiling for the presence of anti-AAV antibodies. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 25, 360–369 (2022).
PROGEN公司成立于1983年,总部位于德国海德堡,由海德堡大学教授联合创办,体外诊断试剂的制造商和供应商,也是德国癌症研究中心的合作伙伴。 主要产品线: 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒)检测试剂盒等。
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