一步法荧光素酶检测，高通量筛选荧光素酶活性

萤光素酶是一类氧化酶的总称，它催化发光反应，这一过程被称为生物发光。酶活性与细胞中萤光素酶的表达成正比，并且可以在添加适当的底物后进行定量。

艾美捷一步法荧光素酶检测：

货号：60690

同义词：荧光素、萤火虫荧光素酶、荧光素酶缓冲液、一步法、步骤、荧光素酶检测缓冲液

需要但不提供的物料：

与使用的发光计兼容的透明底部、白色多孔组织培养板

表达萤火虫荧光素酶的哺乳动物细胞

适当的细胞培养基

实验室平台摇床

发光计

储存/稳定性：

如果按照指示储存，试剂在收到后6个月内性能最佳。首次解冻后，分装储存于-20°C。试剂可以经历几次冻融循环而不会影响功能，但建议尽可能避免冻融循环。

应用：

监测培养的哺乳动物细胞中萤火虫（Photinus pyralis）荧光素酶活性

使用荧光素酶报告基因细胞系进行高通量筛选

运输温度： -20°C（凝胶包或干冰）

注意事项：

? 试剂已在96孔板格式中验证。其他格式需要最终用户进行缩放和优化。

? 使用前荧光素酶试剂缓冲液必须达到约室温（20-25°C）。

? 在测量发光之前至少5分钟将荧光素酶检测试剂添加到细胞中，以允许完全的细胞裂解。

? 为了获得最大的光强度，在试剂添加后1小时内测量样品。

? 孵育期间避免过度暴露于热或光。

? 不同的细胞系可能在裂解能力和/或发光信号上存在差异，可能需要最终用户进行微调。

? 发光信号受检测条件影响。结果应在使用相同细胞类型和培养基/血清组合测量的样本之间进行比较。

? 为了分析多个板，每个板中包含一个共同的对照样品，并将每个板的发光信号标准化到同一板中的对照样品。

? 背景发光是发光计性能的特征，因此，为了准确性，必须从所有读数中减去背景发光。

一步法荧光素酶检测系统旨在高通量、灵敏地定量检测哺乳动物细胞培养中荧光素酶的活性。该试剂由两个组分组成，即荧光素酶试剂缓冲液（组分A）和荧光素酶试剂底物（组分B）。组分A和组分B结合形成工作溶液，包含细胞裂解和荧光素酶定量所需的所有必要试剂。

灵敏度：对荧光素酶活性的检测非常灵敏。

稳定性：信号稳定超过两小时，提供了关于孵育时间的灵活性。

便利性：简单的一步法，均相协议。

高通量：一步法协议最小化了操作步骤，以支持高通量筛选应用。

兼容性：与含有0-10%血清和酚红的多种常见培养基兼容。

仪器：不需要带有注射器的发光计。

一步法荧光素酶检测文献参考：

Patent   LILRB1-based chimeric antigen receptor

Carl Alexander Kamb, Agnes E. Hamburger, ..., Kiran Deshmukh

Peptide Blockers of PD-1-PD-L1 Interaction Reinvigorate PD-1-Suppressed T Cells and Curb Tumor Growth in Mice

Shanshan (Jenny) Zhong, Xiaoling Liu, ..., Vikash Kansal

Cells  |  2024 Jul 15  |  PubMed ID: 39056775

Identification of Novel GANT61 Analogs with Activity in Hedgehog Functional Assays and GLI1-Dependent Cancer Cells

Dina Abu Rabe, Lhoucine Chdid, ..., Yujun Zhao