程序性细胞死亡蛋白 1 (PD-1)(一种在激活的 T 细胞上表达的受体)与其配体 PD-L1 和 PD-L2 的结合会负向调节免疫反应。PD-1 配体存在于大多数癌症中,PD-1:PD-L1/2 相互作用会抑制 T 细胞活性,并使癌细胞逃避免疫监视。PD-1:PD-L1/2 通路还参与调节自身免疫反应,使这些蛋白质成为多种癌症以及多发性硬化症、关节炎、狼疮和 I 型糖尿病的有希望的治疗靶点。
重组表达载体设计用于在哺乳动物细胞中表达人工程 T 细胞受体 (TCR) 激活剂和人 PD-L1(GenBank 登录号 #NM_014143)。转染细胞可与 PD-1/NFAT Reporter/Jurkat T 细胞 (BPS #60535) 结合使用,研究细胞环境中 PD-1 与 PD-L1 配体的相互作用,并筛选该信号通路的调节剂。
在此测定中,PD-1/NFAT Reporter/Jurkat T 细胞用作效应细胞;过表达 PD-L1(或 PD-L2)和工程 T 细胞受体 (TCR) 激活剂的 HEK293 细胞用作靶细胞。当这两种细胞共培养时,效应细胞上的 TCR 复合物被靶细胞上的 TCR 激活剂激活,导致 NFAT 荧光素酶报告基因的表达。然而,PD1 和 PD-L1(或 PD-L2)连接会阻止 TCR 激活并抑制 NFAT 响应性荧光素酶活性。这种抑制可以被抗 PD1 或抗 PD-L1 抗体特异性逆转。PD1/PD-L1 中和抗体可阻断 PD1:PD-L1 相互作用并促进 T 细胞激活,从而重新激活 NFAT 响应性荧光素酶报告基因。
货号:60610
英文名称:PD-L1 / TCR Activator Mammalian Expression Kit
规格:500 rxns.
同义词:程序性细胞死亡 1 配体 1、PDL1、PD-L1、B7 同源物 1、B7H1、B7-H1、CD274、PDCD1L1
物种:人类
储存/稳定性:按照指示保存时,自收到之日起至少可稳定 6 个月。
需要但未提供的材料:
? HEK293 细胞及其生长培养基或其他细胞系
? 用于哺乳动物细胞系的转染试剂
? PD-1/NFAT 报告 Jurkat T 细胞(BPS 目录号 #60535)
? Opti-MEM I 低血清培养基(life Technologies #31985-062)
?解冻培养基 2:RPMI1640 + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素(BPS 货号#60184)
?抗 PD-1 中和抗体(BPS 货号#71120)
?抗 PD-L1 中和抗体(BPS 货号#71213)
? 96 孔组织培养处理的白色透明底检测板
?一步式荧光素酶检测系统(BPS 目录号# 60690)或其他用于测量萤火虫荧光素酶活性的荧光素酶试剂 ? 发光计
PD-L1/TCR激活剂哺乳动物表达试剂盒组分:
PD-L1/TCR激活剂哺乳动物表达试剂盒应用领域:
? 筛选细胞环境中 PD-1 信号传导的激活剂或抑制剂
? 表征PD-1 的生物活性及其与配体的相互作用
BPS bioscience总部坐落于世界最大之一的美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了最大选择之一。
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