Arthrogen-CIA：致关节炎单克隆抗体5-克隆混合物试剂盒实验步骤

小鼠抗II型胶原5克隆单克隆抗体鸡尾酒试剂盒，配有大肠杆菌O111:B4的内毒素（LPS）。

艾美捷CIA：致关节炎单克隆抗体5-克隆混合物试剂盒-10 mg：

货号：53010

应用：用于小鼠胶原抗体诱导性关节炎（CAIA）。

规格：

鸡尾酒：10 mg/ml x 1 ml

LPS：0.5 mg/ml x 1.5 ml

形式：一种溶解在0.05M磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中的5种单克隆抗体的混合物，识别多种II型胶原的保守表位：克隆A2-10（IgG2a）、F10-21（IgG2a）、D8-6（IgG2a）、D1-2G（IgG2b）和D2-112（IgG2b）。克隆A2-10、D1-2G和D2-112识别CB11片段（124-402）中167氨基酸肽片段LyC1（124-290）内的个别表位。克隆F10-21和D8-6识别CB11片段中的83氨基酸肽片段LyC2（291-374）内的表位。

来源：小鼠

交叉反应性：对大多数II型胶原物种（包括小鼠、猪、鸡*、牛、人、鼠、猴、兔、马和狗）有交叉反应。

D2-112不与鸡II型胶原交叉反应。

动物：7-8周龄或更大的高反应小鼠：DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv。

低反应小鼠：C57BL/6或C57BL/6背景。对CAIA的敏感性可能因小鼠供应商和设施而异。强烈建议使用特定病原体阴性（SPF）饲养条件，而不是常规饲养条件，因为细菌污染可能会降低动物的免疫反应，导致关节炎减弱。因此，建议在进行大规模研究之前先进行小规模的初步研究。

使用：建议通过静脉注射（即尾静脉）给药单克隆抗体鸡尾酒；不过，也可以使用腹腔注射（IP）。此外，如果不希望使用LPS，请注意关节炎的严重程度往往较低。

储存条件：-80°C

稳定性：2年

注意事项：

LPS是一种常见的细菌毒素，是免疫系统的强效刺激物。推荐的Arthrogen-CIA?鸡尾酒协议利用LPS注射来触发快速出现的重度关节炎，伴随亚关节炎剂量的抗体。LPS的最佳剂量可能因小鼠品系、动物供应商和饲养条件而异。高剂量的LPS可能对实验动物致命，甚至50 μg/只，具体取决于动物的条件。因此，Chondrex, Inc.建议首先进行无抗体给药的初步研究，以优化LPS剂量（50 μg、25 μg和可能的10 μg，分别测试每个剂量并使用多只小鼠），然后再进行大规模CAIA研究。

Arthrogen-CIA：致关节炎单克隆抗体5-克隆混合物试剂盒-10 mg实验步骤：

A. 在CAIA易感小鼠（DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv）中用单克隆抗体鸡尾酒和LPS诱导关节炎

第0天：通过静脉或腹腔注射1.5 mg的5克隆鸡尾酒。

第3天：通过腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意：在第3-4天观察到中度至重度关节炎，约在第7-10天达到高峰。

B. 在CAIA低反应小鼠（C57BL/6或C57BL/6背景）中用单克隆抗体鸡尾酒和LPS诱导关节炎

第0天：通过静脉或腹腔注射5 mg的5克隆鸡尾酒。

第3天：通过腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意：在第3-4天观察到中度至重度关节炎，约在第7-10天达到高峰。第10-14天注射LPS可用于重新刺激炎症性关节炎。

C. 在DBA/1和Balb/c小鼠中用不含LPS的单克隆抗体鸡尾酒诱导关节炎

第0天：通过静脉注射6-10 mg的5克隆鸡尾酒。

注意：在第2-3天可观察到关节炎。该协议尚未在其他CAIA易感小鼠品系（如B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv小鼠）中确认。

Arthrogen-CIA：致关节炎单克隆抗体5-克隆混合物试剂盒-10 mg文献参考：

K. Terato et al. J. Immunol. 148: 2103-2108 (1992)

K. Terato et al. Autoimmunity 22: 137-147 (1995)

S. Yoshino et al. J. Immunol Methods 343: 49-55 (2009)