SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP同型鉴定方案

SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP试剂盒专为C57BL/6小鼠单克隆抗体的同种型而设计。它含有2.5毫克捕获抗体和1.0 mL AP偶联的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2b、小鼠IgG2c、小鼠IgG3、小鼠IgM、小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。该试剂盒也可用于样本中小鼠免疫球蛋白的定量研究如血清、上清液和腹水，当与C57BL/6小鼠免疫球蛋白组（SB目录号5300）结合使用时-01B）。

艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP（5300-04B）：

- 山羊抗小鼠Ig，人用ads-UNLB

- 山羊抗小鼠Ig，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠IgA-AP

- 山羊抗小鼠IgG1，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠IgG2b，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠IgG2c，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠IgG3，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠IgM，人用ads-AP

- 山羊抗小鼠Kappa-AP

- 山羊抗小鼠Lambda-AP

- pNPP底物片

处理和储存：

- 纯化（UNLB）抗体以2.5毫克纯免疫球蛋白的形式提供，溶于1.0毫升硼酸缓冲盐水中，pH值为8.2。未添加防腐剂或含胺的缓冲盐。储存于2-8°C。

- 碱性磷酸酶（AP）偶联物以1.0毫升库存溶液的形式提供，含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油，pH值为8.0，含有NaN3作为防腐剂。储存于2-8°C或长期储存于-20°C。

- pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。储存于2-8°C。避光保存。

- 如果按照指示储存，试剂在标签上显示的有效期内是稳定的。

建议的同型鉴定方案：

- 将捕获抗体稀释至5-10微克/毫升的浓度，使用硼酸缓冲盐水（BBS），pH值为8.2或磷酸缓冲盐水（PBS），pH值为7.4；向ELISA板的每个孔中加入0.1毫升；或者，用于免疫的抗原可以用作包被试剂。

- 用盖子或塑料膜覆盖板子，并在2-8°C的湿润环境中至少孵育12小时。

- 清空孔洞，用含有0.05% Tween?的BBS（或PBS）洗涤3次，清空孔洞，并用含有1%牛血清白蛋白的BBS（BBS/BSA）填充孔洞。

- 让抗体包被的板子在室温下至少放置1小时，以阻断板上的自由结合位点。

- 清空板子并洗涤3次。

- 向每个孔中加入0.1毫升的杂交瘤上清液，覆盖板子，并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。

- 清空板子并洗涤3次。

- 将AP标记的检测抗体（s）稀释至1:250-1:500的比例，在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶联物到板子的相应孔中，覆盖板子，并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。

- 清空板子并洗涤5次。

- 准备底物缓冲液 - 向400毫升双重玻璃蒸馏水中加入24.5毫克MgCl2?6H2O和48毫升二乙醇胺；用5N HCl调整pH值至9.8，并用蒸馏水补充至500毫升。

- 准备1毫克/毫升的底物溶液（例如，一片5毫克的药片+5毫升底物缓冲液），并向板子的每个孔中加入0.1毫升。

- 在添加底物后，读取每个孔的405纳米处的光密度。

SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP参考文献：

1. Dubovsky JA, Beckwith KA, Natarajan G, Woyach JA, Jaglowski S, Zhong Y, et al. Ibrutinib is an irreversible molecular inhibitor of ITK driving a Th1-selective pressure in T lymphocytes. Blood. 2013;122:2539-49. (ELISA - Serum)

2. Hwang I, Park C, Luong T, Harrison KA, Birnbaumer L, Kehrl JH. The loss of Gnai2 and Gnai3 in B cells eliminates B lymphocyte compartments and leads to a hyper-IgM like syndrome. PLoS One. 2013;8(8):e72596. (ELISA - Serum)

3. Park KS, Bayles I, Szlachta-McGinn A, Paul J, Boiko J, Santos P, et al. Transcription elongation factor ELL2 drives Ig secretory-specific mRNA production and the unfolded protein response. J Immunol. 2014;193:4663-74. (ELISA - Serum)

4. Hwang I, Park C, Harrison K, Boularan C, Galés C, Kehrl JH. An essential role for RGS protein/Gαi2 interactions in B lymphocyte-directed cell migration and trafficking. J Immunol. 2015;194:2128-39. (ELISA - Serum)

SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。  同时，SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体，其中包括：荧光素和酶标记物，低内毒素/不含叠氮化物（LE/AF）制剂，F(ab)和 F(ab')2片段化抗体，此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。