SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-AP解决方案

SBA克隆分型系统AP试剂盒专为小鼠单克隆抗体的同种型而设计。它含有2.5毫克的捕获物抗体和1.0mL AP偶联的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b、小鼠IgG3、小鼠IgM，小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。该试剂盒也可用于定量研究样品中的小鼠免疫球蛋白，如当与小鼠免疫球蛋白组（SB目录号5300-01）结合使用时，作为血清、上清液和腹水。

艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统AP试剂盒（5300-04）组成：

山羊抗小鼠Ig，人用ads-UNLB

山羊抗小鼠Ig，人用ads-AP

山羊抗小鼠IgA-AP

山羊抗小鼠IgG1，人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG2a，人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG2b，人用ads-AP

山羊抗小鼠IgG3，人用ads-AP

山羊抗小鼠IgM，人用ads-AP

山羊抗小鼠Kappa-AP

山羊抗小鼠Lambda-AP

pNPP底物片

处理和储存：

纯化（UNLB）抗体以2.5毫克纯免疫球蛋白的形式提供，溶于1.0毫升硼酸缓冲盐水中，pH值为8.2。未添加防腐剂或含胺的缓冲盐。储存于2-8°C。

碱性磷酸酶（AP）偶联物以1.0毫升库存溶液的形式提供，含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油，pH值为8.0，含有NaN3作为防腐剂。储存于2-8°C或长期储存于-20°C。

pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。储存于2-8°C。避光保存。

如果按照指示储存，试剂在标签上显示的有效期内是稳定的。

建议的同型鉴定方案：

将捕获抗体稀释至5-10微克/毫升的浓度，使用硼酸缓冲盐水（BBS），pH值为8.2或磷酸缓冲盐水（PBS），pH值为7.4；向ELISA板的每个孔中加入0.1毫升；或者，用于免疫的抗原可以用作包被试剂。

用盖子或塑料膜覆盖板子，并在2-8°C的湿润环境中至少孵育12小时。

清空孔洞，用含有0.05% Tween 的BBS（或PBS）洗涤3次，清空孔洞，并用含有1%牛血清白蛋白的BBS（BBS/BSA）填充孔洞。

让抗体包被的板子在室温下至少放置1小时，以阻断板上的自由结合位点。

清空板子并洗涤3次。

向每个孔中加入0.1毫升的杂交瘤上清液，覆盖板子，并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。

清空板子并洗涤3次。

将AP标记的检测抗体（s）稀释至1:250-1:500的比例，在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶联物到板子的相应孔中，覆盖板子，并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。

清空板子并洗涤5次。

准备底物缓冲液 - 向400毫升双重玻璃蒸馏水中加入24.5毫克MgCl2 6H2O和48毫升二乙醇胺；用5N HCl调整pH值至9.8，并用蒸馏水补充至500毫升。

准备1毫克/毫升的底物溶液（例如，一片5毫克的药片+5毫升底物缓冲液），并向板子的每个孔中加入0.1毫升。

在添加底物后，读取每个孔的405纳米处的光密度。

SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-AP参考文献：

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SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。  同时，SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体，其中包括：荧光素和酶标记物，低内毒素/不含叠氮化物（LE/AF）制剂，F(ab)和 F(ab')2片段化抗体，此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。