胰高血糖素ELISA试剂盒样品处理&试剂准备方案

胰高血糖素是一种由胰腺α细胞分泌的肽类激素，对于调节血糖水平具有重要作用。在血糖浓度下降时，胰高血糖素能够促进肝脏将糖原转化为葡萄糖，从而升高血糖。准确测定血液中的胰高血糖素水平对于诊断和监测多种代谢性疾病至关重要。酶联免疫分析（ELISA）作为一种高灵敏度和高特异性的检测方法，已成为实验室和临床检测中的s选技术。

ALPCO胰高血糖素（人、小鼠、大鼠）ELISA试剂盒用于定量测定血浆样本中的大鼠、小鼠或人胰高血糖蛋白。仅供研究使用。不适用于独立程序。

艾美捷胰高血糖素ELISA试剂盒（ALP-48-GLUHU-E01）组成部分：

1. 抗体包被板

2. 胰高血糖素标准品

3. 标记抗原

4. SA-HRP溶液

5. 底物缓冲液

6. OPD片

7. 终止溶液

8. 缓冲液（A）

9. 缓冲液（B）

10. 浓缩洗涤液

11. 粘附膜

胰高血糖素ELISA试剂盒特性：

该试剂盒以敏感的定量能力和高分析特异性为特点。此外，它不受血浆样本中其他组分的影响，且无需样本预处理。本试剂盒中使用的胰高血糖素标准品是一种高纯度的合成产品（纯度高于98%），生物素标记的胰高血糖素经过HPLC纯化。

胰高血糖素ELISA试剂盒分析特异性：

该ELISA试剂盒对胰高血糖素具有高分析特异性，并且对肠道高血糖素、GLP-1和GLP-2没有交叉反应。

胰高血糖素ELISA试剂盒检测原理：

本ELISA试剂盒用于测定大鼠、小鼠或人血浆样本中的胰高血糖素，基于一种竞争性酶免疫分析，使用一种高特异性的抗胰高血糖素抗体和生物素-亲和素系统。96孔板用兔抗胰高血糖素抗体包被。将胰高血糖素标准品或样本和生物素标记的胰高血糖素抗原加入孔中进行竞争性免疫反应。孵化和板洗涤后，加入HRP标记的链霉亲和素（SA-HRP），在孔的表面形成HRP标记的链霉亲和素-生物素标记的胰高血糖素-抗体复合物。最后，通过邻苯二胺二盐酸盐（OPD）测定HRP酶活性，并计算大鼠、小鼠或人胰高血糖素的浓度。

材料：

设备需求（不提供）：

1. 能够读取在490纳米处的吸光度2.5的微孔板阅读器。

2. 能够以100转每分钟的速度摇动的微孔板振荡器。

3. 微孔板洗涤装置及带抽吸系统的分配器。

4. 用于8孔或12孔的微量移液管和多通道移液管及其吸头。

5. 用于制备标准溶液的试管。

6. 1000毫升的量筒。

7. 蒸馏水或去离子水。

样本处理：

血浆样本的准备

推荐使用含EDTA-2Na的血液采集管来收集血浆样本，并应立即添加抑肽酶（每1毫升血液添加500kIU）。强烈建议在采集后尽快测试血浆样本。如果需要延后测试，应将样本分装到试管中，并在-30°C或更低温度下冷冻（推荐-70°C以下），在分析前解冻。避免样本反复冻融。

试剂准备：

1. 标准溶液的准备：取标准品（冻干的大鼠/小鼠/人胰高血糖素，每瓶10ng）用1毫升缓冲液（A）进行溶解，得到浓度为10000 pg/mL的标准溶液。取0.5毫升溶解后的标准溶液，并用1.0毫升缓冲液（A）稀释，得到3333 pg/mL的标准溶液。按相同稀释比例依次制备出其他浓度的标准溶液（1111, 370, 123, 和 41 pg/mL）。以缓冲液（A）作为0 pg/mL的对照。

2. 标记抗原溶液的准备：用6毫升缓冲液（B）溶解标记的抗原。

3. 底物溶液的准备：将1片OPD片溶解在12毫升底物缓冲液中。应在使用前立即准备。

4. 洗涤溶液的准备：用蒸馏水或去离子水将50毫升浓缩洗涤溶液稀释至1000毫升。

5. 其他试剂：其他试剂直接使用。