在生命科学研究中,了解蛋白质的热稳定性对于理解其结构、功能和相互作用至关重要。而近年来,一项被广泛应用的技术——热稳定性(Thermal shift)技术,正在帮助科学家们揭开蛋白质的热秘密。让我们一起来了解这项令人兴奋的技术。
热稳定性技术的原理是基于蛋白质的热变性特征。当蛋白质受到热力刺激时,其结构会发生变化,从而导致蛋白质的失活。而热稳定性技术则利用荧光探针或染料来监测蛋白质在不同温度下的热变性过程。通过在溶液中加入荧光探针或染料,当蛋白质发生热变性时,探针或染料与蛋白质的相互作用发生改变,从而引起荧光信号的变化。通过分析荧光信号的变化曲线,科学家们可以确定蛋白质的热稳定性,并进一步研究其结构和功能。
热稳定性技术具有许多优势。首先,它是一种高通量的技术,可以同时测试多个样品,大大提高了实验效率。其次,热稳定性技术无需复杂的操作步骤和昂贵的仪器设备,适用于各种类型的生物样本,包括蛋白质溶液、细胞裂解液和组织提取物等。此外,热稳定性技术还可以与其他技术相结合,如质谱分析和结构生物学方法,进一步揭示蛋白质的性质和功能。
热稳定性技术在许多领域都有广泛的应用。在药物发现和开发中,热稳定性技术可以用于筛选药物候选化合物对目标蛋白的影响,从而帮助研究人员优化药物设计。在生物工程领域,热稳定性技术可以用于改进蛋白质的稳定性和表达效率,提高生产过程的可行性和效率。此外,热稳定性技术还可以用于研究蛋白质的折叠和组装过程,以及蛋白质的相互作用和信号传导等重要生物学过程。
热迁移测定是一种快速且廉价的技术,可量化蛋白质变性温度的变化,可用于筛选影响蛋白质热稳定性的条件,例如蛋白质突变、配体结合和缓冲液配方(如 pH、盐、去垢剂)和其他添加剂)。这些测定快速(通常约30分钟)并在定量PCR系统上进行。热迁移方法与高通量筛选兼容,并且比圆二色性和差示扫描量热法等方法需要更少的蛋白质。
特征:
最适合qPCR仪器和ROX标准化的绿色荧光
与高浓度洗涤剂兼容
耐受较宽的pH范围、还原剂和常见的缓冲液/赋形剂
非常适合高通量检测、低反应量和低蛋白质浓度
在水性缓冲液中高度溶解和稳定
热迁移分析的预期用途:
优化缓冲液配方以提高蛋白质稳定性和储存
确定突变如何影响蛋白质的稳定性
快速筛选用于蛋白质结合的小分子候选药物和其他配体
环境敏感的荧光染料可用于监测蛋白质的温度依赖性展开,蛋白质的解链温度 (Tm) 是蛋白质热稳定性的指标。 |
溴结构域蛋白的小分子抑制剂已在癌症模型中显示出治疗效果。在此,在溴结构域抑制剂 JQ1或RVX-208存在的情况下,对10 ug溴结构域BRD2进行了GloMelt热迁移测定。如熔解曲线的变化所示,抑制剂结合使蛋白质稳定。 |
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产品名称 | 货号 | 规格 |
GloMelt? Thermal Shift Protein Stability Kit | 200assays | |
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Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen,以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。
目前,Biotium已将其许多专利技术授权给一些主要的国际生物技术公司,包括安捷伦、BD生物科学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。 宝天生物科技(BTProbes)由美国荧光试剂企业Biotium公司于2007年在华成立,是一家专注于生物荧光试剂研发的高科技企业,是多家欧美企业长期供货商,产品被广泛应用于生命科学各个领域。目前宝天可提供超过100款热卖的荧光蛋白(PE, APC),其他荧光原料(FITC),用于PCR荧光原料(5-FAM,6-TAMRA)等。
作为Biotium在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Biotium的产品。
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