蛋白尿是人类和实验动物中肾炎的常见症状,也是评估疾病严重性的一个重要标志,无论肾炎的类型如何。此外,蛋白尿是通过测定在16小时内排泄的总蛋白质(如球蛋白和白蛋白)量来确定的,这比单纯测定尿液中蛋白质浓度更为准确,因为不同动物之间的尿液体积变化较大。浑浊度法是一种常用的尿蛋白检测方法,因为它准确、简单且经济。
然而,小鼠肾脏会漏出血清成分,如胆红素,导致尿蛋白水平被高估,因此蛋白尿并不适合用作评估肾炎严重性的标志。另一方面,白蛋白是一种相对分子量较小的血清蛋白,通常是肾功能开始受损时尿液中首先出现的蛋白,更适合用于评估小鼠模型中肾炎的严重性。
Chondrex推出的小鼠尿白蛋白检测ELISA试剂盒旨在采用夹心免疫检测法,在4小时内专门测定40个尿样中的小鼠白蛋白。在小鼠肾炎模型中,如免疫复合物诱导的肾小球肾炎(ICGN),如果16小时尿液收集中的总白蛋白含量超过1毫克,则认为小鼠具有肾炎。值得注意的是,尿液中的白蛋白水平可以根据肾炎的严重程度,在16小时尿液收集中达到50-200毫克。
艾美捷Chondrex小鼠白蛋白检测试剂盒:
货号:3012
格式:96孔ELISA板,带可拆卸条
检测类型:夹心ELISA
检测时间:4小时
标准范围:100 - 1.6 ng/ml
样本数量:每板最多40个(重复)样本
样本类型:尿液和血清
推荐样本稀释倍数:至少1:500
显色剂:OPD(在490 nm读取)
储存条件:-20°C保存12个月
验证数据:实验内变异系数(1.6-1.9%)、实验间变异系数(1.7-2.6%)、加标试验(89-98%)
Chondrex小鼠白蛋白检测试剂盒清单:
小鼠白蛋白标准(30121)
数量:1瓶
规格:100 ng,冻干
存储:-20°C
捕获抗体(30122)
(山羊抗小鼠白蛋白多克隆抗体)
数量:1瓶
规格:50 ?l,1 mg/ml
存储:-20°C
检测抗体(30123)
(生物素化山羊抗小鼠白蛋白多克隆抗体)
数量:1瓶
规格:冻干
存储:-20°C
溶液A 涂层缓冲液(9052)
数量:1瓶
规格:10 ml
存储:-20°C
溶液C 样品/标准/二级抗体稀释缓冲液(30106)
数量:1瓶
规格:50 ml
存储:-20°C
溶液D 铂维生素过氧化物酶稀释缓冲液(9055)
数量:1瓶
规格:20 ml
存储:-20°C
铂维生素过氧化物酶(9029)
数量:2瓶
规格:50 ?l/瓶
存储:-20°C
OPD(90021)
数量:2瓶
规格:冻干
存储:-20°C
染色剂稀释缓冲液(90022)
数量:1瓶
规格:20 ml
存储:-20°C
停止溶液 2N硫酸(9016)
数量:1瓶
规格:10 ml
存储:-20°C
洗涤缓冲液,20X(9005)
数量:1瓶
规格:50 ml
存储:-20°C
96孔ELISA板
数量:1个
规格:8孔条 x 12
存储:-20°C
计算结果:
对空白、标准品和测试样品的重复OD值取平均。
从第1步中平均的OD值中减去“空白”(B)值。
将标准品的OD值绘制与小鼠白蛋白浓度(ng/ml)的关系图。使用对数/对数图将数据线性化。图1展示了一个代表性实验,其中标准范围为1.6 - 100 ng/ml。
通过回归分析可以计算测试样品中小鼠白蛋白的ng/ml值。
图1 - 小鼠白蛋白检测ELISA试剂盒的典型标准曲线
Chondrex 致力于开发和生产高纯度胶原蛋白、抗胶原蛋白单克隆抗体和多种ELISA试剂盒等产品,为研究人员提供研究类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis ,RA)发病机制和筛选潜在治疗方法所需的工具。艾美捷科技是Chondrex的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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