【Biotium爆品】活死细菌染色试剂盒

前情回顾：Biotium：微生物(细菌，真菌&酵母)荧光染色及活力检测全套工具 

产品描述：

Biotium的Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live & Dead Cells(30027)通过两个DNA探针DMAO和EthD-III对活细菌(绿色)和死细菌(红色)进行双色荧光染色。DMAO 是一种绿色荧光核酸染料，可对活细菌和死细菌进行染色。Ethidium Homodimer III (EthD-III) 是一种红色荧光核酸染料，可选择性地对细胞膜受损的死细菌进行染色。当用 DMAO 和 EthD-III 的混合物染色时，细胞膜完整的细菌会发出绿色荧光，而细胞膜受损的细菌会发出红色荧光。该试剂盒适用于荧光显微镜和流式细胞仪。检测原理是通用的，适用于大多数细菌类型。用于100次流式细胞检测或1000次显微镜检测。 

特征：

• 检测同一细胞群中的活细胞和死细胞

• 简单、快速的免洗染色

• 用于荧光显微镜或流式细胞术

产品推荐：

DMAO，5 mM 溶液(2 x 100 uL) 

EthD-III，2 mM 溶液(2 x 150 uL)  

1、储存和处理在4℃下避光储存，按推荐储存条件，产品的稳定期限至少为收到日期后的2年。DMAO和EthD-III染料与核酸结合。

2、光谱特性DMAO：Ex/Em：503/530nm（与DNA共存时） 乙溴化二聚体III（EthD-III）：Ex/Em：532/625nm*（与DNA共存时） *EthD-III在279nm处也有强烈的紫外吸收峰

3、分析方案

1）荧光显微镜染色方案

• 将染料储备溶液加热至室温，并振荡混合。

• 通过将1微升DMAO、2微升EthD-III和8微升150毫摩尔氯化钠（参见分析注意事项＃2）组合，制备100倍浓度的染色溶液。振荡以确保充分混合。 注意：根据需要，体积可以按比例调整。

• 在微离心管中，通过以10,000 x g离心5分钟并去除上清液来收集细菌细胞。

• 可选：用150毫摩尔氯化钠洗涤细胞一次，通过上下移液数次。

• 通过以10,000 x g离心5分钟并去除上清液来沉淀细菌细胞。

• 在150微摩尔氯化钠中重新悬浮细胞100微升。

• 向100微升细菌悬浮液中加入1微升染料混合物。

• 轻轻混合，并在避光条件下室温孵育15分钟。

• 将样品中的5微升转移到玻片上，涂上玻璃盖片，并用CoverGrip Coverslip Sealant（23005）或指甲油密封。

• 通过荧光显微镜对标记的细胞进行成像。DMAO可以使用FITC滤光片组进行成像，EthD-III可以使用Texas Red?或Cy?3滤光片组进行成像。

2）流式细胞术染色方案

①. 按照上述荧光显微镜染色方案的步骤①-⑧进行操作。 

注意：我们建议还制备仅用DMAO染色的死细胞和仅用EthD-III染色的死细胞的单染细菌样品。 

②. 加入0.5ml流式细胞术分析中的常用缓冲液。 

③. 进行流式细胞术分析，检测FITC通道中的DMAO，以及PE或PE-Texas Red?通道中的EthD-III。    

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司，公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多，包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。   

目前，Biotium已将其许多专利技术授权给一些主要的国际生物技术公司，包括安捷伦、BD生物科学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。   宝天生物科技(BTProbes)由美国知名荧光试剂企业Biotium公司于2007年在华成立，是一家专注于生物荧光试剂研发的高科技企业，是多家欧美企业长期供货商，产品被广泛应用于生命科学各个领域。目前宝天可提供超过100款热卖的荧光蛋白(PE, APC)，其他荧光原料（FITC），用于PCR荧光原料（5-FAM，6-TAMRA）等。   

作为Biotium在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的Biotium的产品。