胰弹性蛋白酶ELISA使用方案及注意事项说明

胰腺弹性蛋白酶ELISA用于定量测定胰腺人体粪便样本中的弹性蛋白酶。在美国境内用于体外诊断美国和加拿大作为诊断胰腺外分泌功能不全的辅助工具。

艾美捷胰弹性蛋白酶ELISA（30-PANHU-E01）检测原理：

该ELISA用于定量测定粪便中的胰蛋白酶。在第1次孵育步骤中，样品中的胰蛋白酶与固定在微孔板表面的单克隆抗体结合。为了去除所有未结合的物质，进行洗涤步骤。在第二次孵育步骤中，加入一种过氧化物酶标记的结合物（小鼠抗胰蛋白酶抗体），该结合物特异性识别已结合的胰蛋白酶。经过另一次洗涤步骤以去除所有未结合的物质后，固相与底物四甲基联苯胺（TMB）孵育，TMB与过氧化物酶反应。随后加入酸性终止液以停止反应。颜色由蓝色变为黄色。黄色的强度与胰蛋白酶的浓度成正比。通过使用标准品获得的值生成吸光度单位（在450 nm处的光密度，OD）与浓度的剂量反应曲线。

供应的材料：

需要但未提供的材材料：

? 用于分发高达1000 ?L的精密移液器（带一次性吸头）

? 用于分发高达1000 ?L的可重复或多通道移液器

? 用于试剂准备的量筒和移液器

? 用于试剂准备的蒸馏水/去离子水

? 微孔板洗涤器或洗涤瓶

? 能够以550转/分钟、2毫米轨道的微孔板振荡器

? 微孔板读取器

? 用于样品准备的漩涡混合器

? 覆盖微孔板的箔片

? 计时器

胰弹性蛋白酶ELISA注意事项：

1. 试剂盒组分中使用的人源材料经过检测，结果为人类免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）阴性。然而，出于安全原因，所有试剂盒组分应被视为潜在的传染性物质。

2. 试剂盒中的试剂含有作为防腐剂的叠氮钠或ProClin。叠氮钠或ProClin对健康和环境有害。酶促颜色反应的底物也可能引起皮肤和/或呼吸道刺激。必须避免与这些物质接触。可在ALPCO应要求提供的安全数据表中找到进一步的安全信息。

3. 终止液由稀释后的硫酸组成，是一种强酸。尽管已经稀释，但仍需谨慎处理。它可能导致灼伤，应戴手套、眼睛保护和适当的防护服操作。任何溢出应立即用大量水擦拭。不要吸入蒸汽，避免吸入。

4. 10倍浓缩洗涤缓冲液含有表面活性剂，如果接触到眼睛，可能会引起严重的眼部刺激。

警告：引起严重的眼部刺激

如果进入眼睛：用水小心冲洗几分钟。如果可能且容易的话，取出隐形眼镜。继续冲洗。如果眼部刺激持续，请寻求医疗建议/关注。

5. 避免与皮肤直接接触。

6. 本产品不可内服。使用本产品时，避免吃东西、喝水或吸烟。不要使用嘴部移液任何试剂。

9. 此试剂盒中的试剂是批次特定的，不得替换。

10. 不要使用试剂盒标签上标明的过期日期之后的试剂。

11. 不建议对测试程序进行变更，可能会影响测试结果。

储存条件：

试剂盒应储存在2-8°C。如果储存得当，试剂盒在盒子标签上的过期日期前是稳定的。

胰弹性蛋白酶ELISA试剂准备：

所有试剂在使用前必须平衡至室温。只准备足够使用的条数的试剂。体积小于100 μL的试剂在使用前应离心，以避免体积损失。

控制品（1级和2级）和标准品以冻干形式提供，并在标签上标明的有效期内，在2-8°C下是稳定的。重悬细节在特定批次的数据表中给出。重悬后的标准品和控制品不稳定，无法储存。

洗涤缓冲液浓缩液（10倍）在使用前必须用蒸馏或去离子水1:10稀释（100 mL 洗涤缓冲液 + 900 mL 蒸馏/去离子水），并混合均匀。由于浓缩液中盐浓度高，可能会有晶体出现。在使用前，晶体必须在室温或37°C水浴中重新溶解。洗涤缓冲液在标签上标明的有效期内在2-8°C下是稳定的。1倍工作洗涤液（1:10稀释的洗涤缓冲液）可以在2-8°C下储存在封闭的烧瓶中，有效期为1个月。

提取缓冲液浓缩液（2.5倍）在使用前必须用蒸馏或去离子水1:2.5稀释（100 mL 提取缓冲液 + 150 mL 蒸馏/去离子水），混合均匀。由于浓缩液中盐浓度高，可能会有晶体出现。在使用前，晶体必须在37°C水浴中重新溶解。提取缓冲液在标签上标明的有效期内在2-8°C下是稳定的。1倍工作提取缓冲液（1:2.5稀释）可以在2-8°C下储存在封闭的烧瓶中，有效期为4个月。

结合物浓缩液（101倍）必须在1倍工作洗涤液中1:101稀释（100 ?L 结合物浓缩液 + 10 mL 1倍工作洗涤液）。如果运行半板，准备8 mL的结合物（80 ?L + 8 mL 1倍工作洗涤液）。结合物在标签上标明的有效期内在2-8°C下是稳定的。制备好的结合物（1:101稀释的结合物）不稳定，无法储存。

所有其他测试试剂都可以直接使用。当储存在2-8°C时，测试试剂在标签上标明的有效期内是稳定的。