Cayman《文献解读》：FINO2诱导剂，助力铁死亡(Ferroptosis)研究

铁死亡是一种由铁依赖的脂质过氧化引起的非凋亡性细胞死亡方式，它在器官损伤、退行性疾病以及对治疗抵抗的癌症中扮演着关键角色。

Eikan等人发表在线研究《A non-canonical vitamin K cycle is a potent ferroptosis suppressor》，本文研究了一种新型的非典型维生素K循环在抑制铁死亡（ferroptosis）中的重要作用。研究团队通过探索维生素K的不同形式（包括phylloquinone、menaquinone-4和menadione）在抑制铁死亡中的作用，发现了维生素K氢醌（VKH2）作为强大的脂质过氧化抑制剂，并通过FSP1（NAD(P)H-ubiquinone还原酶）维持VKH2水平。

一、研究方法

1. 细胞实验：

使用了多种细胞系，包括小鼠胚胎成纤维细胞（Pfa1）、人纤维肉瘤细胞（HT-1080）、人黑色素瘤细胞（A375）等，通过诱导铁死亡，评估不同形式的维生素K对细胞活力的影响。

使用RSL3、erastin、FINO2等诱导剂触发铁死亡，并通过添加phylloquinone、menaquinone-4、menadione及已知的铁死亡抑制剂如Liproxstatin-1来评估其保护作用。

2. 维生素K的还原及检测：

通过质谱分析检测MK4（menaquinone-4）在FSP1和NADH作用下的还原产物MK4-氢醌（MK4-H2）。使用BODIPY 581/591 C11染色检测细胞内脂质过氧化水平。

3. 动物实验：

在Gpx4敲除小鼠中研究MK4对肝损伤的保护作用。

通过肝脏和肾脏的缺血再灌注损伤模型，评估MK4对组织损伤的保护效果。

4. 铁螯合活性及抗氧化能力检测：

使用金属螯合剂如去铁胺（DFO）作为对照，评估维生素K的铁螯合活性。

通过FENIX（Fluorescence-Enabled Inhibited Autoxidation）实验检测维生素K及其衍生物的脂质过氧化抑制能力。

二、实验结果

1. 维生素K的抗铁死亡作用：

所有三种形式的维生素K（phylloquinone、menaquinone-4、menadione）均能在细胞实验中显著抑制由RSL3等诱导剂触发的铁死亡。在Gpx4敲除小鼠中，MK4能够延长小鼠的生存时间并减轻肝损伤，表明其对铁死亡引起的组织损伤具有保护作用。

2. FSP1在维生素K还原中的作用：

FSP1能够将维生素K还原为VKH2，后者作为强大的脂质过氧化抑制剂，通过消耗NAD(P)H来保护细胞免受铁死亡损伤。在FSP1敲除细胞中，维生素K的抗铁死亡作用显著减弱，表明FSP1在维持VKH2水平中的关键作用。

3. FINO2的作用：

FINO2（货号：25096，由Cayman公司生产）作为铁死亡诱导剂，在本研究中未直接评估其对维生素K循环或FSP1活性的影响。然而，作为铁死亡研究的重要工具，FINO2在触发铁死亡过程中发挥了关键作用，为评估不同抑制剂或保护剂的效果提供了重要对照。

三、结论

1. 维生素K的非典型循环：

维生素K通过FSP1介导的非典型循环被还原为VKH2，后者作为脂质过氧化抑制剂在保护细胞免受铁死亡损伤中发挥了重要作用。FSP1不仅是铁死亡的重要控制因子之一，还是维生素K循环中的关键还原酶。

2. FINO2的价值：

作为铁死亡诱导剂，FINO2为研究铁死亡机制及开发相关抑制剂提供了重要工具。通过与不同形式的维生素K及其衍生物联合使用，可以进一步揭示维生素K在铁死亡中的作用机制及潜在的治疗应用。

Cayman品牌的FINO2（货号：25096）

来源：Cayman公司，一家成立于1980年的知名生物科技公司，专注于为全球科研工作者提供高质量的研究产品。

作用：FINO2作为铁死亡诱导剂，在细胞实验中用于触发铁死亡过程，为评估维生素K及其衍生物、FSP1等因子的抗铁死亡作用提供了重要参照。

应用：广泛应用于铁死亡相关的基础研究及药物开发领域，是铁死亡研究不可或缺的工具之一。

综上所述，本文深入探讨了维生素K在抑制铁死亡中的重要作用及其机制，揭示了FSP1在维生素K还原循环中的关键作用。同时，作为铁死亡诱导剂的FINO2（货号：25096）在研究中发挥了重要作用，为进一步揭示铁死亡机制及开发相关治疗药物提供了有力支持。