1968年,Arne Boyum博士报告了一种从人血中分离单核细胞的简单有效方法。35多年来,一种名为LymphoprepTM的商业介质被广泛用于分离这些细胞。
单核细胞(单核细胞和淋巴细胞)的浮力密度低于红细胞和多形核(PMN)白细胞(粒细胞)。绝大多数单核细胞的密度低于1.077 g/ml。因此,这些细胞可以通过在密度为1.077 g/ml的等渗介质上离心来分离,这使得红细胞和PMN可以通过介质沉降,而将单核细胞保留在样品/介质界面。
所述方法是快速、简单、可靠的,并且对正常人和患者的血液样本都能得到极好的结果。
为了获得最大的产量,重要的是在将血液样本应用于梯度之前,先用生理盐水按1:1稀释。单核细胞悬浮液中红细胞的污染通常在总细胞数的3-10%之间。
在强烈的免疫抑制治疗期间,一些未成熟的PMN可能会与淋巴细胞一起沉积。当使用肝素化血液时,必须去除大部分血小板,以避免在细胞毒性测试中产生抑制。每批Lymphoprep都使用特定的LAL测试检查内毒素水平。目标是提供内毒素水平低于或等于0.13 IU/ml的批次。
对于生产的每批产品,可以根据要求提供显示实际密度、渗透压和内毒素值的分析证书。我们还根据Ph.Eur.声称无菌。
Lymphoprep的制造、包装和放行符合GMP和ISO 13485的规定。
LymphoprepTM可用于制备纯淋巴细胞悬浮液,用于组织分型、抗淋巴细胞血清和免疫学研究。Thorsby和Brattelie在制备用于细胞毒性测试和淋巴细胞培养的纯淋巴细胞悬浮液时,仅对这种技术进行了轻微的修改。
艾美捷PROGEN-LymphoPrep (6x500 ml):
货号 1858-6
数量 6瓶 x 500毫升
预期用途 仅供研究使用
产品描述 Lymphoprep?是一种现成的、无菌的、经过内毒素检测的溶液,用于分离纯淋巴细胞悬浮液。该溶液含有三碘酸钠和多糖。
密度 1.077 ± 0.001 克/毫升
成分 9.1% (w/v) 三碘酸钠,5.7% (w/v) 多糖
渗透压 290 ± 15 mOsm
内毒素 < 1.0 欧盟单位/毫升
稳定性与储存 Lymphoprep?在保持无菌并避免光照的条件下可稳定保存3年。长时间直接暴露在阳光下会导致三碘酸钠分子释放碘。在日常使用该溶液时,这种影响是可以忽略不计的。Lymphoprep?应储存在+4°C至+30°C的温度范围内。
PROGEN-LymphoPrep (6x500 ml)主要特点:
现成的、无菌且经过内毒素检测的溶液
高效的密度梯度介质,用于从稀释血液中纯化人类单核细胞(单核细胞和淋巴细胞)
一个订单单位包含6瓶x500毫升的Lymphoprep?。
文献参考:
Hust, M. et al. Enrichment of open reading frames presented on bacteriophage M13 using Hyperphage. Biotechniques 41, 335–342 (2006).
PROGEN,体外诊断试剂的制造商和供应商。 主要产品线: 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒)检测试剂盒等。
艾美捷科技是PROGEN的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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