AAT Bioquest-Amplite比色次氯酸(次氯酸)检测试剂盒解决方案

次氯酸根阴离子（ClO-）及其质子化形式次氯酸（HClO）是生物系统中的关键活性氧（ROS）。次氯酸盐（次氯酸）的不受控制的产生会导致组织损伤和疾病，包括关节炎、肾功能衰竭和癌症。此外，次氯酸钠（NaClO）已被广泛用作漂白剂，用于我们日常生活中的表面清洁、除臭和水消毒。接触大量次氯酸钠会导致中毒，症状包括严重的呼吸问题、胃部刺激、皮肤和眼睛发红和疼痛。因此，对次氯酸盐（次氯酸）的高选择性和高灵敏度检测具有毒理学和环境重要性。Amplite?比色次氯酸盐（次氯酸）检测试剂盒提供了一种灵敏的基于吸收的检测方法，用于高特异性地测量次氯酸盐。在与次氯酸盐（次氯酸盐）发生选择性反应后，无色Oxirite?次氯酸盐传感器会产生强烈的颜色产物。颜色信号可以通过吸收微孔板阅读器在~580nm处测量。使用此比色次氯酸（次氯酸）检测试剂盒，可以检测到痕量的次氯酸盐。

艾美捷AAT Bioquest-Amplite比色次氯酸(次氯酸)检测试剂盒（#13845）方案概要：

1. 准备次氯酸工作溶液（50 ?L）

2. 添加次氯酸标准品或待测样品（50 ?L）

3. 在室温下孵化3-5分钟

4. 在OD为555 ± 5 nm时监测吸光度增加

重要?在实验开始前，在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

仪器：吸光度微孔板读取器

吸光度：555 ± 5 nm

推荐板：透明底部

图：使用Amplite比色次氯酸/次氯酸检测试剂盒在96孔透明底板中测量次氯酸盐。孵育3-5分钟后检测到低至0.5uM的次氯酸钠（NaClO）。

样品实验方案：

表1. 在96孔透明底部微孔板中次氯酸标准品和待测样品的布局。H = 次氯酸标准品（H1 - H7，0.001%至1%），BL = 空白对照，TS = 待测样品。

BL BL TS TS

H1 H1 ... ...

H2 H2 ... ...

H3 H3    

H4 H4    

H5 H5    

H6 H6    

H7 H7    

表2. 每个孔的试剂组成。

孔 体积 试剂

H1-H7 50 ?L 系列稀释（0.001%至1%）

BL 50 ?L 测定缓冲液（组分B）

TS 50 ?L 待测样品

如表1和表2所示，在96孔透明底部微孔板中准备次氯酸标准品（H）、空白对照（BL）和待测样品（TS）。对于384孔板，每个孔使用25 ?L试剂代替50 ?L。

向次氯酸标准品、空白对照和待测样品的每个孔中添加50 ?L次氯酸工作溶液，使每个孔的次氯酸测定总体积为100 ?L。对于384孔板，每个孔中添加25 ?L工作溶液，总体积为50 ?L/孔。

在避光的条件下，室温下孵化反应3-5分钟。

使用吸光度板读取器在OD = 555 ± 5 nm时监测吸光度增加。

部分文献参考：

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation

Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.

Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides

Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.

Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water

Authors: Zhang J, Yang X.

Journal: Analyst (2013): 434

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite

Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.

Journal: Molecules (2013): 1638

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water

Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.

Journal: Exp Anim (2013): 237

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