Digoxigenin-11-dUTP,通过PCR,Nick Translation等应用整合到DNA / cDNA中,用于DNA / cDNA探针的制备,测序等方面。
Digoxigenin-11-dUTP,地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸可通过以下方法整合到DNA/cDNA中:
1.用Taq聚合酶进行PCR
2.用DNAse I / DNA聚合酶I进行Nick Translation
3.用Klenow exo-进行引物延伸
4.用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记寡核苷酸3'末端
5.用MMLV逆转录酶进行逆转录
Digoxigenin-11-dUTP,地高辛/二硝基苯酚修饰的核苷酸可通过以下方法整合到RNA中:
用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记3'末端
推荐的用于PCR和Nick Translation的Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比例:35%地高辛-11-dUTP / 65%dTTP
请注意:Digoxigenin-11-dUTP的终浓度取决于应用和实验条件。为获得良好的产品收率和高掺入率,建议单独优化Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比率
艾美捷Digoxigenin-11-dUTP,地高辛/二硝基苯酚(NU-803-DIGXS):
运输:通过凝胶包进行运输。
存储条件:应在-20°C的环境下保存。
短期(累计最多1周)暴露于室温下是可行的。
保质期:12个月。
分子式:C43H65N4O21P3(自由酸形式)。
分子量:1066.91克/摩尔(自由酸形式)。
精确质量:1066.34克/摩尔(自由酸形式)。
纯度:高于或等于95%(通过高效液相色谱法测定)。
形态:在10 mM Tris-HCl溶液中的过滤溶液,分子量截留30 kDa。
颜色:无色至淡黄色。
浓度:1.0 mM至1.1 mM。
pH值:7.5,误差范围±0.5。
光谱特性:zui大吸收波长λmax为290纳米,摩尔吸光系数ε为8.8 L·摩尔^-1·厘米^-1(Tris-HCl,pH 7.5)。
应用:
生物素-11-dUTP可以通过以下方法嵌入到DNA或cDNA中:
使用Taq聚合酶进行聚合酶链式反应(PCR)。
利用DNA酶I/DNA聚合酶I进行缺口翻译(Nick Translation)。
使用Klenow exo-进行引物延伸(Primer Extension)。
使用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,简称TdT)进行3'端标记。
使用MMLV逆转录酶进行逆转录。
此外,生物素-11-dUTP还可以通过以下方法嵌入到RNA中:
使用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)进行3'-端标记。
Digoxigenin-11-dUTP,地高辛/二硝基苯酚相关产品:
HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX
Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX
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