His标签是蛋白重组技术中经常用到的一种标签,其序列为六个组氨酸HHHHHH, 其特点是分子量小,通常插入在目的蛋白的C末端或N末端,基本不改变目的蛋白的生物结构,也不改变蛋白质的溶解性。
His标签蛋白纯化通常采用固定化金属离子亲和层析(Immobilized Metal Affinity Chromatography,IMAC)的纯化方法,这是因为His标签可与通过鳌合配体固定在层析介质上金属离子(如Ni2+、Co2+、Cu2+、Zn2+等)发生相互作用,因此带有His标签的蛋白在经过装配了金属离子的层析介质时可以选择性的结合在介质上,而其他的杂质蛋白则不能结合或仅能微弱结合,从而得到纯度较高的His标签蛋白。用IMAC进行His标签蛋白纯化是目前原核蛋白表达纯化中最常用的方法。
作为G-Biosciences全国总代理,艾美捷科技强烈推荐G-Biosciences一系列固定化金属亲和层析(IMAC)树脂和预装柱,用于His标签蛋白纯化。
镍螯合树脂(His标签蛋白纯化最常用的IMAC纯化树脂,具有高结合效率和低非特异性结合)
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
786-281 | Nickel Chelating Resin | 10ml resin | 不同规格的树脂 |
786-407 | Nickel Chelating Resin | 100ml resin | |
786-408 | Nickel Chelating Resin | 500ml resin | |
786-429 | Nickel Chelating Resin | 2 x 500ml resin | |
786-392 | Nickel Chelating Resin, 0.2ml Spin Column | 25 columns | 预装柱 |
786-393 | Nickel Chelating Resin, 1ml Spin Column | 5 columns | |
786-394 | Nickel Chelating Resin, 3ml Spin Column | 5 columns |
钴螯合树脂(结合效率略低,但非特异性结合显著减少,适用于有价值的且量少的His标签蛋白)
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
786-286 | Cobalt Chelating Resin | 10ml resin | 不同规格的树脂 |
786-402 | Cobalt Chelating Resin | 100ml resin | |
786-403 | Cobalt Chelating Resin | 500ml resin | |
786-600 | Cobalt Chelating Resin | 2 x 500ml resin | |
786-454 | Cobalt Chelating Resin, 0.2ml Spin Column | 25 columns | 预装柱 |
786-455 | Cobalt Chelating Resin, 1ml Spin Column | 5 columns | |
786-456 | Cobalt Chelating Resin, 3ml Spin Column | 5 columns |
锌螯合树脂
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
786-287 | Zinc Chelating Resin | 10ml resin | 树脂 |
铜螯合树脂
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
786-285 | Copper Chelating Resin | 10ml resin | 树脂 |
****His标签蛋白纯化系统:分别可提供镍、钴、铜、锌离子鳌合树脂作为纯化媒介,而这四种离子对于6 x His的结合力大小为:铜>镍>锌>钴,而这四者对6 x His的亲和吸附的选择性大小为,:钴>锌>镍>铜。
纯化相关试剂
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
786-542 | His Binding/Wash Buffer | 100ml | His标签蛋白纯化结合/洗涤液 |
786-543 | His Elution Buffer | 100ml | His标签蛋白纯化洗脱缓冲液 |
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