我们今天要介绍的是miRNA绝对定量的新方法-miRNA酶联免疫分析（miREIA）。大量研究表明，miRNA是人类病理学中有潜力的诊断和预后生物标志物。
miREIA检测原理：将生物素标记的特异性DNA寡核苷酸与样本中分离出的miRNA杂交。 然后将DNA / RNA杂交体转移到固相上，固相涂有对完美匹配的RNA / DNA-生物素杂交体的特异单克隆抗体。然后将洗涤后的固相与链霉亲和素-HRP偶联物一起孵育，并通过发色底物?3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）进行显色观察，吸光度与血液样本中存在的特定miRNA种类的浓度成比。
同时我们也测试了miREIA在各种生物样品中的性能。我们使用miREIA试剂盒对从全血，HeLa细胞，外周血单核细胞，结直肠癌组织，关节滑液，唾液和尿液样本中分离的miRNA进行定量，结果表明，我们的miREIA试剂盒可以很好的对上述所有样本中的miRNA进行定量，检测结果如下：
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| 全血样本中miRNA的分离及定量：将全血收集到PAXgene血液RNA收集管中。 使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA，该试剂盒旨在从培养的细胞，人/动物组织，植物组织和全血中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了十二种不同miRNA的绝对浓度。 |
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| Hela细胞样本中miRNA的分离及定量： 使用 RNA分离试剂盒（RIK001）从HeLa细胞中分离RNA。8种不同miRNA的绝对浓度由miREIA试剂盒测定. |
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| PBMC细胞样本中的miRNA定量：采用His-topaque密度梯度离心法从全血中分离外周血单核细胞(PBMC)。使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA。7种不同mirna的绝对浓度由miREIA试剂盒测定. |
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| 直肠癌组织样本中miRNA提取及定量：切除获得的结直肠癌(CRC)组织被稳定并储存在RNAlater溶液中。使用RNA分离试剂盒（RIK001）分离RNA。8种不同mirna的绝对浓度由miREIA试剂盒测定. |
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| 关节滑液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒（RIK002）从滑液中分离RNA。 通过miREIA试剂盒测量了五个不同miRNA的绝对浓度. |
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| 唾液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清RNA分离试剂盒（RIK002）从唾液中分离RNA。 通过BioVendor miREIA试剂盒测量了两种不同的miRNA的绝对浓度. |
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| 尿液样本中miRNA的分离及定量: 使用血浆/血清 RNA分离试剂盒（RIK002）从尿液中分离RNA。通过miREIA试剂盒测量了两种不同miRNA的绝对浓度。 |
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