【前情回顾】:
【1】您不曾了解系列:微管蛋白tubulin染色(活细胞),点击了解
【2】您不曾了解系列2:活细胞微丝F-actin染色(兼容固定细胞),点击了解
【3】您不曾了解系列3:活细胞DNA染色,点击了解
脂类是脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)的统称。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质,脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中,脂类染色法最常用于证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂滴(Lipid Droplet)是中性脂(主要有脂酰甘油和酯化胆固醇)的主要贮存场所,是脂肪细胞的主要成分,占据脂肪细胞的大部分空间。正常情况下,除脂肪细胞以外的其他细胞内一般不见或仅能看到微量脂滴。但病理情况下,这些细胞中可能出现脂滴或者脂滴明显增多,通过脂肪染色能将这些脂滴清晰的显现出来。比如,心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性,胞浆内出现大小不一的空泡,可用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水性变性或糖原贮存等。
目前脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等,这种脂肪染色方法,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色的过程,经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好,根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)会对组织切片产生较好的染色效果。
用苏丹染料进行脂类染色,多用用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油明胶和阿拉伯糖胶等,在免疫组化研究中应用较多,苏丹染料主要针对于组织切片的脂质染色,同时灵敏度也较低,且存在操作过程中试剂挥发过多,易形成背景沉淀,无法兼容活细胞等局限。
作为专业的生命科学解决方案供应商,艾美捷科技为您推荐来源于活细胞染色领域领导品牌Cytoskeleton的全球畅销产品:兼容活/固定细胞或组织及其他染料的脂质染色探针:
产品名称 | 规格 | 货号 | 适用的滤光片 |
LipiBright? 530 SMCy3.5: Fluorogenic Lipid Droplet Probe | 70nmol | MG11 | TRITC |
LipiBright? 650 SMCy5.5: Fluorogenic Lipid Droplet Probe | 70nmol | MG12 | Cy5 |
LipiBright? 700 SMCy7.0: Fluorogenic Lipid Droplet Probe | 70nmol | MG13 | Cy7 |
染色结果展示:
LipiBright SMCy3.5标记的Swiss3T3细胞单层:用LipiBright SMCy3.5标记的活Swiss 3T3(粉红色)、活细胞Actin细胞骨架染色(绿色,SiR-Actin)和活细胞DNA探针(蓝色,SPY505-DNA). |
LipiBright SMCy5.5标记的Swiss3T3细胞单层: 用340uM LipiBright SMCy5.5(白色)标记活Swiss3T3细胞的荧光成像. |
LipiBright SMCy7.0标记的Swiss3T3细胞单层: 340 nM LipiBright SMCy7.0(白色)标记活Swiss3T3细胞的成像. |
v 产品化学结果及荧光特性:
LipiBright? 530 SMCy3.5:Ex/Em: 530nm/558nm
LipiBright? 650 SMCy5.5:Ex/Em: 650nm/670nm
LipiBright? 700 SMCy7.0:Ex/Em: 700nm/770nm
v 产品保存:
该探针以冻干粉形式提供,冻干粉在4℃(湿度<10%)下可稳定保存6个月,并应避光保存。溶解之前,简单离心以收集管底的粉末。一管LipiBright可溶于200ul无水DMSO以配制340uM储备液用于细胞成像,或与40ul无水DMSO重组,以配制用于组织或小生物成像的1.5 mM储备液液,溶解后的溶液应储存在-20℃可稳定6个月。
使用该产品的引文:
Collot M. et al. 2018. Ultrabright and Fluorogenic Probes for Multicolor Imaging and Tracking of Lipid Droplets in Cells and Tissues. JACS, 140, p.5401-5411.
Ohsaki Y. et al. 2005. Fixation and permeabilization proto-col is critical for the immunolabeling of lipid droplet proteins. Histochem Cell Biol,124(5), p.445-52. doi: 10.1007/s00418-005- 0061-5.
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