溴化乙锭(Ethidium bromide,EB)是应用早且成熟的核酸染料,并且由于其价格便宜、灵敏度高,早期被实验者广泛应用。但其分子量小,很轻易就能穿透细胞膜,属于诱变剂,具有高致癌性,对人体潜在危害非常大。实验者使用时需要谨慎再谨慎,另外,单独的EB区占用了实验室的大块空间,废胶、废液的处理费时、费力又费钱,真是让人又爱又恨。
GelRed(红色)和GelGreen(绿色)是荧光染料领域顶级供应商Biotium厂家开发的高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭(EB),并且灵敏度远高于EB,同时不需要脱色处理。由于GelRed和EB有相同的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高,并能排除染料对DNA迁移的干扰 。使用 GelRed进行电泳后染色,操作简单,不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在0.1M NaCl 中,并将凝胶置于染色液中,30分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定,可以多次反GelRed&GelGreen,GelRed核酸染料,Biotium复使用。相比而言,预制凝胶由于不需要额外染色过程,因此染料用量更少,更为简单经济。
GelRed核酸染料的特点: Gelred其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。
主要优势如下:
无 毒 性:GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。
灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
稳定性高: 可以使用微波炉加热,可以在室温下保存。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
适用范围广:适用于预制凝胶(胶染法)和凝胶电泳后染色(泡染法)。
与标准凝胶成像系统完美兼容 :使用 312nm 激发的UV凝胶成像系统时, GelRed可以完美的替代EB。
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