细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测,对细胞死亡或细胞毒性的评估往往是基于细胞质膜损伤来定量的。
【首选方法】
LDH(乳酸脱氢酶法)方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性,同时也是现如今科研工作者最快捷的检测方式。 乳酸脱氢酶(LDH,Lactate dehydrogenase)是一种稳定的酶,存在于所有细胞类型中,并且在质膜损伤后迅速释放到细胞培养基中。因此,LDH是细胞毒性研究中使用最广泛的标记物。
【产品基本信息】
货号:D-AKE1030
规格:480T
储存:-20℃保存6个月
原理:
该测定基于在典型的细胞毒性测定中,将靶细胞与细胞毒性化学试剂或细胞毒性细胞(NK细胞,细胞毒性T细胞)一起培养,以诱导靶细胞死亡和LDH释放。将含有LDH的上清液转移至新的96孔测定板的孔中,并与LDH Reaction Solution混合。在LDH的作用下,NADH和四唑盐MTT反应生成NAD+ 和MTT的还原形式,该MTT的还原形式在565 nm处表现出最大吸收,产生的颜色强度与裂解的细胞数直接相关。在室温下孵育30分钟后,使用酶标仪读取565 nm的吸光度。
特点:
分析化合物或环境因素对细胞死亡的作用。
LDH从细胞内被释放到培养基中,形成了一个可视化的颜色反应。
检测范围:10,00-100,0000个洗细胞/孔。
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