BMA Biomedicals：纯抗血清多克隆抗体

解析文章：《Synapses Between Corticotropin-Releasing Factor-Containing Axon Terminals and Dopaminergic Neurons in the Ventral Tegmental Area Are Predominantly Glutamatergic》

链接：https://www.unboundmedicine.com/medline/citation/18067140/Synapses_between_corticotropin_releasing_factor_containing_axon_terminals_and_dopaminergic_neurons_in_the_ventral_tegmental_area_are_predominantly_glutamatergic_

一、背景

研究背景：

长期以来，应激与中脑边缘多巴胺（DA）系统之间的相互作用备受关注，这种相互作用在行为和电生理研究中均有体现。促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）在应激反应中扮演重要角色，特别是在下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴和中脑边缘DA系统中。CRF通过影响不同神经通路，参与调节应激反应和药物成瘾行为。

研究目的：

本研究旨在探讨VTA（腹侧被盖区）内CRF与DA神经元之间的相互作用，特别是CRF阳性轴突末梢与DA神经元之间的突触联系。

二、方法

实验动物：

使用总计24只雄性Sprague-Dawley大鼠，体重180-200克。大鼠在恒温（20°C）的动物房中单独饲养，遵循12小时光照周期，自由获取食物和水。

灌注与固定：

大鼠经心脏灌注固定，使用含3.75%丙烯醛和2%多聚甲醛的固定液。脑组织振动切片（50μm），进行后续免疫组织化学和电子显微镜分析。

免疫组织化学：

使用多种商业化抗体，包括抗CRF（BMA Biomedicals品牌T-4037）、抗酪氨酸羟化酶（TH，DA神经元标记物）、抗谷氨酸脱羧酶（GAD，GABA神经元标记物）、抗囊泡谷氨酸转运体1和2（vGluT1和vGluT2，谷氨酸能神经元标记物）。单标和双标免疫染色方法结合使用，通过ABC法和免疫金银染色法检测目标蛋白。

电子显微镜分析：

超薄切片（70nm）在透射电镜下观察，记录并分析CRF阳性轴突末梢与VTA内神经元的突触联系。

三、实验中的BMA Biomedicals品牌T-4037产品作用与价值

产品作用：

特异性识别CRF：BMA Biomedicals品牌的T-4037抗体特异性地识别CRF，不与其他相关肽类（如尿皮质素I、II、III）交叉反应。这种特异性确保了免疫染色的准确性，使得研究者能够精确地定位VTA内的CRF阳性神经元和轴突末梢。

高灵敏度：T-4037抗体在免疫染色中表现出高灵敏度，能够清晰地标记出VTA内的CRF阳性结构，为后续的双标实验和电子显微镜分析提供了可靠的基础。

产品价值：

支持研究假设：通过T-4037抗体的使用，研究成功地揭示了VTA内CRF阳性轴突末梢与DA神经元之间的突触联系，为理解应激与DA系统相互作用提供了新的视角。

推动神经科学研究进展：该产品的应用不仅加深了我们对CRF在应激反应中作用的理解，也为药物成瘾、情绪障碍等神经精神疾病的研究提供了新的线索和思路。

促进跨学科合作：神经科学、免疫学、药理学等多学科的交叉合作使得本研究得以顺利进行，而T-4037抗体作为连接这些学科的桥梁，发挥了不可或缺的作用。

四、实验结果

CRF在VTA内的分布：

CRF免疫反应性主要存在于轴突末梢，少量存在于树突。

CRF阳性轴突末梢在VTA内形成对称性和非对称性突触，分别对应抑制性和兴奋性突触。

突触类型与神经递质共表达：

大多数CRF阳性轴突末梢形成的非对称性突触共表达vGluT2，表明这些突触为谷氨酸能兴奋性突触。

部分CRF阳性轴突末梢形成的对称性突触共表达GAD，表明这些突触为GABA能抑制性突触。

CRF与DA神经元的突触联系：

CRF阳性轴突末梢主要与DA神经元的树突形成非对称性突触，提示CRF可能通过兴奋性突触调节DA神经元的活性。这种突触联系可能参与了应激诱导的DA释放和药物成瘾行为的调节。

五、结论

主要发现：

CRF在VTA内主要通过谷氨酸能兴奋性突触与DA神经元相互作用，这种相互作用可能介导了应激对DA系统的调节。研究还发现，部分CRF阳性轴突末梢形成GABA能抑制性突触，提示VTA内CRF神经元功能的复杂性。

研究意义：

本研究揭示了CRF与DA系统之间新的突触联系模式，为理解应激与药物成瘾行为之间的相互作用提供了新的分子和细胞机制。

研究结果对于开发针对应激相关神经精神疾病的新型治疗策略具有重要意义。

未来研究方向：

进一步研究CRF阳性神经元在VTA内的具体来源和投射靶标。探讨不同应激条件下CRF与DA系统相互作用的动态变化及其功能意义。开发针对CRF及其受体的新型药物靶点，为神经精神疾病的治疗提供新的选择。

BMA Biomedicals品牌Monoclonal Antibody To Mouse MHC Class II

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF），纯抗血清多克隆抗体（货号：T-4037）

兔抗促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）（人，小鼠，大鼠）[UniProt: P06850, Q8CIT0, P01143]

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）是一种由196个氨基酸的前激素衍生而来的41个氨基酸的肽激素。它是下丘脑对应激的反应，刺激促肾上腺皮质激素（ACTH）的合成和分泌。CRF也在外周组织和胎盘中合成，已知可抑制食欲并增加主观焦虑感。该抗体是通过将CRF偶联载体蛋白免疫兔而产生的。

Product number: T-4037

Clone: polyclonal

Host species: Rabbit IgG

Quantity: 50 ul

Format: Neat undiluted antiserum, lyophilized, packaged under nitrogen.

Reconstitute by adding 50?l distilled water. This will give the equivalent

of undiluted antiserum

Stability: Original vial: at least one year at 4? - 8?C from date of delivery. Minimize

repeated thawing and freezing of the antiserum by freezing aliquots at

-20?C or below.

Reacts: Human, Mouse, Rat

Applications:This antibody has been tested and validated in ELISA against CRF and

in immunohistochemistry (IHC). Other applications like FACS or Western

Blot may work as well. Optimal dilutions should be determined by the

end user.

Immunogen: Synthetic peptide H-Ser-Glu-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr-PheHis-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Met-Ala-Arg-Ala-Glu-Gln-Leu-Ala-GlnGln-Ala-His-Ser-Asn-Arg-Lys-Leu-Met-Glu-Ile-Ile-NH2 coupled to carrier

protein