Spherotech：SPHERO 荧光微球

微球（又称乳胶微球或乳胶颗粒）, 是胶体粒度范围内的球形颗粒, 由诸如聚苯乙烯等非晶态聚合物形成。

荧光微球一般指微球的表面标有荧光物质(包括表面包覆)或微球体内结构含有荧光物质(如包埋或聚合)的微球,受到外界能量刺激能激发出荧光。它是一种载有荧光分子的功能性微球,其外形一般为球形。近年来,随着荧光探针技术研究的深入,人们已经能够制备各种各样的粒径从纳米级到亚微米级的荧光微球。

荧光微球作为一类特殊的功能微球,以其稳定的形态结构、窄的粒径分布、好的单分散性和高效的发光效率,吸引了国内外研究者广泛的关注,且在许多领域尤其是生物医学领域有很重要的应用。首先，荧光微球的载体多为有机或无机聚合物材料。

荧光微球的应用：

①在标记和示踪方面的应用

通过在聚合物微球表面或内部引入一种或多种荧光物质制备的荧光微球,可应用到细胞标记、生物分子标记及在活性条件下的示踪,也可固定蛋白质分子等,并跟踪其功能化过程。

②在检测方面的应用

将表面带有能与被检测物结合的配体的荧光微球与放射标记的被检测物相混合,体系中能与微球结合的被检测物,其放射能激发荧光物质产生荧光,而不能与微球结合的被检测物,其放射能在水中淹灭,不能激发荧光,从而可以对被检测物进行检测。此外，荧光微球能够携带许多荧光分子,较弱的刺激就可以引发较强的信号,所以只需要少量的低能辐射就能产生荧光信号,避免了使用传统的放射性微球造成的辐射危险,并在不损失检测灵敏度的前提下降低了成本。

③在免疫分析、药物筛选方面的应用

1）荧光微球由于其可作为诊断试剂而应用于免疫分析。

荧光微球作为不同检测对象的固定化载体应用于生物样品检测中,不同荧光微球对应不同的捕获抗体,识别不同的抗原,从而实现多种待测抗原定性及定量检测。

2）荧光微球表面连接可与待测物结合的受体,将待测物(配体)进行放射性同位素标记,两者混合后,能与微球结合的待测物的放射性能激发荧光物质产生荧光,而不能与微球结合的待测物,由于距离微球较远,则不能激发荧光物质产生荧光,从而达到了筛选的目的。高通量药物筛选(HTS)是使用机器人和自动化系统,从大量的样本中鉴别出对确定的分子靶标有相互作用的少量活性化合物的一种现代药物筛选技术。荧光微球的发展促进了HTS的开发与发展。

④在固定化酶，基因研究方面的应用

1）酶可以通过物理吸附或化学键合方式固定在荧光微球上,由于酶的立体形态被固定,使其不但具有较高的pH稳定性、热稳定性和贮存稳定性,而且易与反应物分离，可以重复使用,提高使用效率。因此,在微球载体上固定化酶或其它生物活性物质, 更有利于其功能的发挥。

2）纳米级荧光微球的尺寸与生物分子如核苷酸、蛋白质等尺度相当,表面连接或包埋大量荧光分子聚合物。将此类微球连接在核苷酸链上,便可替代传统芯片杂交荧光标记技术,实现荧光信号的放大,从而大大降低了基因芯片的成本。

⑤在标准物和生物探针方面的应用

1）荧光微球在细胞流式记数测定方面有很重要的应用 ,如用做测定的标准物以及用来校准细胞流式记数仪。

2）制备含有Cd Te量子点的聚苯乙烯微球,其表面吸附兔的免疫球蛋白后，可以作为蛋白质灵敏检测探针,且这种生物功能性标记的量子点微球具有简单、快速和实用性强等优点。

 今天给大家带来的是微球领域知名的供应商Spherotech的SPHERO^TM荧光微球：

SPHERO^TM荧光微球是通过用荧光基团溶液染色聚苯乙烯颗粒或通过在聚苯乙烯核心颗粒存在下聚合苯乙烯中的荧光团来制备的。我们可以提供不同尺寸、不同颜色荧光基团、不同荧光强度和表面官能团的各种荧光微球。选择用于制备SPHERO^TM荧光颗粒的荧光团是非水溶性的，因此是非常稳定的。这些荧光团一旦结合到颗粒中，就不会浸出，并且它们的颜色和荧光在在适当的储存条件下可保存很长时间。SPHERO^TM荧光微球颜色及管够光谱如下图所示：

SPHERO^TM荧光微球有各种尺寸和荧光强度的单个或多个荧光团，尺寸和荧光的变化系数都很小。它们可用于乳胶凝集、荧光显微镜、共聚焦荧光显微镜。这些颗粒中的许多可以用于流式细胞术。四个通道2.9μm尼罗红颗粒（目录号FP-3056-2）的流式细胞仪直方图如图20所示。SPHEROTM荧光颗粒的更多流式细胞术数据如下图

部分荧光微球的流式细胞数据：

*使用具有以下激发和发射波长的Dako Cyan ADP获得的尺寸大于1.0um的微球的数据：

Violet 1:Ex 405nm，Em.450/50nm；Violet 2：Ex.405nm，Em.530/40nm；FITC：Ex.488nm，Em.530/40nm；PE：Ex. 488nm，Em. 575/25nm；

TR：Ex 488nm，Em.613/20nm；PE-Cy5:Ex 488nm，Em.680/30nm；PE-Cy7:Ex 488nm，Em.＞750nm；APC：Ex. 633nm，Em. 665/20nm；

APC-Cy7:633nm，Em.>750 nm

SPHERO^TM聚苯乙烯荧光微球：

高荧光强度和低荧光强度的微球：

荧光PMMA微球：

多重荧光基团的微球：

FITC标记的微球(可用于流式细胞仪的校准及不同的流式细胞数据的归一化)：

Spherotech公司是全球知名的微球产品生产商之一。 Beckton Dickinson(BD)公司即用Spherotech的Rainbow荧光微球来对其流式细胞仪进行灵敏度的校验。Spherotech公司生产的微球广泛的应用于生物医学研究和诊断，包括免疫荧光和免疫酶学检测等。其微球适用于荧光显微镜技术、激光共聚焦(Confocal)技术、流式细胞术、影像细胞术、磁性细胞分离技术、磁珠酶免测定法(EIA)等多种检测方法。Spherotech常规生产高质量的乳胶微球、荧光微球、顺磁性微球、铁磁性微球和多种有色微球，这些微球表面可根据应用的需要添加不同的功能基团(如羧基和氨基等)。此外，Spherotech公司还生产各种包被有抗体或配体，如亲合素、链霉亲合素和生物素等的微球，用于免疫学的研究和临床。  

作为Spherotech在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Spherotech的产品。