Lectenz：SiaFind Pan-Specific Lectenz Kit

胰腺导管腺癌（PDAC）是一种极具侵袭性的癌症，5年生存率仅为约11%。其预后差的主要原因是晚期诊断和有限的治疗选择。

尽管免疫检查点阻断（ICB）等免疫疗法在多种癌症中提高了患者生存率，但在PDAC中效果不佳，主要由于低突变负荷和多种免疫抑制机制。

CAF是PDAC肿瘤微环境（TME）中的关键成分，占总肿瘤质量的比例高达80%，并富含细胞外基质和特殊结缔组织细胞。CAF通过分泌多种因子和细胞间相互作用，对免疫系统产生显著影响。 唾液酸是一种糖链修饰，通过Siglec受体在免疫细胞上发挥免疫检查点作用。唾液酸的过表达与多种癌症的免疫逃避相关。

Kelly等人就CAF通过唾液酸-Siglec相互作用调节巨噬细胞分化的机制发表了在线研究《Pancreatic cancer-associated fibroblasts modulate macrophage differentiation via sialic acid-Siglec interactions》

方法

实验材料与方法

细胞系：文章使用了多种CAF细胞系（如M1CAF、T1CAF、PS-1CAF）和肿瘤细胞系（如BxPC3、MiaPaca-2）。

免疫组织化学（IHC）：利用Lectenz品牌的唾液酸特异性探针（pan-Lectenz）对PDAC患者组织样本进行染色，以检测唾液酸表达。

流式细胞术：使用Lectenz探针及多种Siglec-Fc融合蛋白，分析CAF细胞系和肿瘤细胞系上唾液酸的表达及其与Siglec受体的相互作用。

共培养实验：将CAF细胞系与单核细胞共培养，观察单核细胞向巨噬细胞的分化情况。

基因敲除与抑制实验：利用CRISPR-Cas9技术敲除特定基因（如CMAS、ST3GAL4、Siglec-9），或使用唾液酸转移酶抑制剂（SI），研究唾液酸在CAF介导的免疫调节中的作用。

实验

唾液酸在CAF中的表达与功能

组织染色：通过IHC染色发现，PDAC组织中CAF区域的唾液酸表达显著高于肿瘤细胞区域。

转录组分析：利用公共数据库和单细胞RNA测序（scRNA-Seq）数据，发现CAF高表达与唾液酸合成相关的基因，特别是ST3GAL4酶。

功能验证：通过抑制CAF上的唾液酸合成（使用SI或CMAS敲除），发现唾液酸在CAF介导的巨噬细胞分化中起关键作用。

CAF与巨噬细胞的相互作用

共培养实验：CAF细胞系与单核细胞共培养后，单核细胞显著分化为具有免疫抑制功能的TAM样巨噬细胞。

Siglec受体作用：发现CAF上的唾液酸作为配体，与巨噬细胞上的Siglec-7、Siglec-9、Siglec-10和Siglec-15受体相互作用，促进巨噬细胞的免疫抑制分化。

关键酶的作用：通过敲除CAF中的ST3GAL4酶或巨噬细胞中的Siglec-9受体，进一步验证了唾液酸-Siglec轴在CAF介导的巨噬细胞分化中的核心作用。

在本研究中，Lectenz品牌的产品起到了关键性作用：

特异性染色：Lectenz品牌的SiaFind Pan-Specific Lectenz Kit(SK0501)被用于检测PDAC患者组织样本中的唾液酸表达，显示出在CAF区域的高表达水平，这为后续实验提供了关键线索。

流式细胞术分析：在流式细胞术中，Lectenz探针也被用于检测CAF细胞系和肿瘤细胞系表面唾液酸的表达情况，以及这些细胞与Siglec受体的相互作用，为理解CAF的免疫调节机制提供了有力工具。

结论

CAF唾液酸在免疫调节中的关键作用

唾液酸表达差异：CAF区域唾液酸表达显著高于肿瘤细胞，且CAF上的唾液酸主要作为Siglec-7、Siglec-9、Siglec-10和Siglec-15的配体。

巨噬细胞分化调控：CAF通过唾液酸-Siglec相互作用，显著促进单核细胞向具有免疫抑制功能的TAM样巨噬细胞分化。

治疗潜力：针对CAF唾液酸的靶向治疗可能成为一种新的免疫疗法策略，用于改善PDAC患者的治疗效果。

Lectenz品牌产品的价值

精准检测：Lectenz品牌的唾液酸特异性探针为精准检测组织样本和细胞系中的唾液酸表达提供了可靠工具。

科学研究支持：在流式细胞术和IHC实验中，Lectenz探针的高特异性和灵敏度对于深入理解CAF的免疫调节机制至关重要。

临床应用潜力：基于Lectenz探针的研究结果，未来可能开发出针对唾液酸-Siglec轴的靶向治疗药物，为PDAC患者带来新的治疗希望。

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