1、什么是内毒素?
早在 19 世纪末,Albert Charrin 和 Armand Ruffer 等科学家通过简单而有效的实验证明,过滤培养的细菌可以在没有完整细胞的情况下引起发烧。细菌学家理查德·弗里德里希·约翰内斯·菲佛后来发现了内毒素的存在,他发现部分细菌本身,在他的案例中是霍乱弧菌,会引起中毒。
我们今天知道,这种作用是由脂多糖 (LPS) 介导的,它是革兰氏阴性菌外膜 (OM) 的重要组成部分(图1)。这意味着,与名称所暗示的相反,内毒素存在于细菌外部。
图 1:内毒素,也称为脂多糖 (LPS),是革兰氏阴性菌外膜的主要成分,在细胞裂解时释放或作为外膜囊泡 (OMV) 的一部分释放。 |
LPS提供了必要的渗透屏障,并覆盖了例如多达75%的大肠杆菌表面。这使其成为细胞表面最丰富的抗原。LPS 对于大多数革兰氏阴性菌的生存是必不可少的。在哺乳动物中,LPS 可引起致热(发热反应)反应,并通过诱导炎性细胞因子影响许多细胞功能。
经典的脂多糖结构,如左图所示,由物种之间差异很大的O侧链(O抗原)、称为核心寡糖的中间区域和糖脂(Lipid A)锚定在外膜。O抗原的存在与否决定了LPS是粗糙的还是光滑的。 |
2、内毒素检测的用途是什么?
只要需要评估研究中使用的生物和环境样品的完整性,内毒素检测就很有用。
示例包括:
1)无菌样品的认定
2)辅助评估人类/兽医细菌感染
3)水和环境空气质量指标
4)食品保质期确定(牛奶、果汁、海鲜等)
3、EndoAlert 毒素检测试剂盒合适的样品类型:
4、EndoAlert 内毒素检测试剂盒
Rockland 提供两种内毒素检测试剂盒 (RUO)。两种试剂盒都使用鲎变形细胞裂解物 (LAL),这是一种来自鲎 ( Limulus polyphemus ) 的血细胞提取物,可与LPS 发生反应。
产品/货号 | 显色裂解物 | 内毒素标准品 | LAL Reagent | 内毒素特异性组成缓冲液 | 96孔板 |
EndoAlert? 内毒素检测试剂盒(KMA-0100) | 是 | 是 | 是 | - | 是 |
EndoAlert? ES内毒素检测试剂盒(KMA-0200) | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 |
上述两款试剂盒均基于在405 nm处测量的显色鲎试剂,比凝胶法更灵敏、更定量。EndoAlert 内毒素检测试剂盒使用的是LAL Reagent,它能同时与LPS(内毒素)和 BD-葡聚糖(真菌污染物)发生反应。
EndoAlert ES 内毒素检测试剂盒使用内毒素特异性组成缓冲液,该缓冲液可灭活并阻断G因子通路(真菌)。C因子(LPS 结合蛋白)通路保持完整,检测内毒素时特异性更强。
5. 为什么选择 EndoAlert? 内毒素检测试剂盒?
①检测的成本低 - 由Trident Biosystems设计,该公司拥有70多年的鲎试剂制造经验,允许采用精益求精的方法进行开发,从而降低每次检测的成本。
②易于使用 - 为研究和临床使用而设计的用户友好协议,无专门为Pharma指定的复杂的、受USP监管的测试要求。
③灵敏度高 - 跟市场上任何Pharma认证的试剂盒同样敏感,并且比市场上任何研究用试剂盒更敏感、更稳定且功能更优越。
④对环境友好 - 原材料的收集高度小心,并由自然资源部监控,以确保合规。
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