前情回顾:超品质荧光蛋白——PE & APC
藻红蛋白 (PE)
Peridinin-Chlorophyll-Protein(PerCP) 是从甲藻(Dinophyceae sp.)中分离出的分子量35.5 kDa 的多甲藻黄素-叶绿素-蛋白质复合物。它具有较宽的激发光谱,主峰在482 nm处,有较大的斯托克位移,发射最高峰在677 nm处。PerCP及其偶联物是适用于细胞表面标记技术(如流式细胞术)的大型复合物。
PerCP的优势:
长波长发射可最大限度地减少生物材料自发荧光的干扰
藻胆素与蛋白质骨架的共价结合使荧光淬灭的影响最小
极高的水溶性便于进行化学偶联
较大的斯托克位移,可用于多重染色分析
多个位点可与合成的有机化合物(如抗体、CY染料或AF染料)稳定结合
偶联物可用于多色流式细胞术,可使用单个激发光产生多个发射信号
表1. PerCP光谱信息一览:
指标 | 参数 |
适配激光器 | 488nm |
Ex(nm) | 482nm |
Em(nm) | 677nm |
过滤器 | Cy5 |
PerCP相关产品
我们提供多类PerCP产品,包括CD抗体、二抗、链霉亲和素偶联物、标记试剂盒、PerCP串联染料等。为了快速的用PE标记抗体和其他蛋白质,请使用不含硫酸铵缓冲液的冻干PerCP。硫酸铵的去除消除了繁琐的蛋白质纯化过程(例如透析),从而实现快速简便的标记偶联。我们还提供PerCP串联染料,用于使用单一激发光源的多色流式细胞术。
用于白细胞群和亚群免疫表型分析的CD抗体偶联物
二抗偶联物
链霉亲和素偶联物
用于蛋白质标记的PerCP和串联染料
PerCP和串联染料抗体标记试剂盒
相关产品推荐:
货号 | 名称 | 规格 |
PerCP [Peridinin-Chlorophyll-Protein] | 1mg |
PerCP, PE和APC串联染料
PerCP, PE和APC串联染料是由两个不同的荧光团共价连接组成,一个供体(例如R-PE或APC)和一个发射更长波长的荧光受体(例如Cy5、Cy5.5、Cy7或iFluor 647)。在这种构象中,一个荧光团(称为“供体”)的激发导致能量转移到另一个荧光团(称为“受体”)并发出荧光。这种从供体到受体的能量转移是通过福斯特共振能量转移或FRET发生的。在流式细胞术中,串联染料非常适合用于细胞的多色参数分析,因为它们只需要单个激发光源和有着更大的斯托克斯位移。如图:FITC、PE、PerCP-Cy5.5和PE-Cy7无需荧光补偿即可对细胞进行四色分析。四种荧光团都被488nm氩离子激光有效地同时激发。
FITC(绿色)、PE(黄色)、PerCP-Cy5.5(橙色)和PE-Cy7(红色)的吸收和发射光谱显示出清晰的光谱分离,可以对细胞进行四色分析。四种荧光团都被488nm氩激光线(蓝色)有效激发。FITC可以使用FITC过滤器进行可视化。PE可以使用Cy3过滤器进行可视化。PerCP-Cy5.5和PE-Cy7可以分别使用Cy5和Cy7过滤器进行可视化。
串联染料使用注意事项:
避免长时间暴露在光照下,串联染料对光非常敏感,应始终避光。
不要冷冻串联偶联物,这会导致供体变性
注意,固定和破膜的操作会降低串联染料的亮度
在用于多色流式细胞术时请使用适当的对照,例如用于背景、未染色细胞的同种型对照和用于补偿的单色对照
由于这是两个或多个具有重叠发射光谱的串联染料,请在分析数据之前确定是否需要荧光补偿
相关产品推荐:
货号 | 名称 | 规格 |
Preactivated PerCP-Cy5.5 | 10mg | |
RPE-Cy7 Tandem | 1mg | |
B-CHM312 | Preactivated RPE-Cy5 | 10mg |
B-CHM314 | Preactivated RPE-Cy5.5 | 1mg |
B-CHM315 | Preactivated RPE-Cy7 | 1mg |
Biogradetech生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商:Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。
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