Epigentek：EpiNext CUT&LUNCH RNA Kit

利用CUT和LUNCH RIP加速蛋白质/RNA相互作用研究

RNA免疫沉淀（RIP）被广泛用于分析蛋白质和RNA之间的相互作用，但无法实现高分辨率，再现性差，过程漫长复杂。使用EpiNext?CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒，您可以比以往更快地对靶蛋白/RNA复合物进行高度特异性富集。

极速三步：

CUT&LUNCH（目标下裂解和均匀释放独特核酸复合物）是EpigenTek最近开发的一项技术，旨在为研究体内DNA-蛋白质相互作用提供一种比ChIP和CUT&RUN更快速、更高效的替代方法。这一创新技术现已被整合到新的CUT&LUNCH RIP试剂盒（货号：P-2037-24）中，用于超快速、高度特异地富集目标蛋白-RNA复合物。

CUT&LUNCH RIP整合了当前RIP检测和CUT&RUN的所有优势，是富集RNA结合蛋白特异性RNA复合物最快且最便捷的方法。

1、快速协议：在不到2小时内完成您的检测。

2、低背景：选择性消除非特异性蛋白-RNA复合物。

3、高特异性和分辨率：仅回收抗体结合的复合物。

4、性价比高：每反应的价格不到竞争对手RIP产品的一半。

不要因为漫长的协议而耽误时间。用CUT&LUNCH RIP简化您的研究，夺回您的时间——没有减速，只有流程化的成功。

EpiNext CUT&LUNCH（目标下裂解和均匀释放独特核酸复合物）RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒（货号：P-2037-24）提供了一种快速高效的方法来研究体内蛋白质-RNA相互作用。它整合了目前使用的RIP和CUT&RUN的所有优势，CUT&RUN是一种新的蛋白质-DNA相互作用分析方法。

CUT&LUNCH RIP试剂盒具有以下优势和特点：

1、极快速的三步协议：直接从完整的细胞开始，无需裂解和交联。整个检测过程可以在1小时50分钟内完成，最小化RNA损伤和解离的RNA结合组分的丢失，保持原生蛋白质-RNA结构。

2、提高特异性和最小化背景：独特的核酸裂解酶通过在目标蛋白/RNA复合物两端切割或移除RNA序列，确保低序列偏好，不影响目标蛋白占据的RNA。释放的非特异性蛋白-RNA复合物被选择性消除，只回收抗体结合的复合物。因此，可以通过高分辨率映射可靠地实现和识别目标蛋白富集区域。

3、低输入材料：强大的未结合RNA裂解和免疫捕获都在同一个管中处理。这种方法使用细胞和组织，并允许最大限度地保护目标蛋白，最小化样本损失。结果，输入的细胞数量可以少至20,000个细胞，不到传统RIP所需最小量的5%。

4、广泛的适用性：适用于各种物种的培养细胞以及新鲜和冷冻组织中的不同RNA结合蛋白，同时保持检测的特异性和灵敏度。

5、高度便捷：试剂盒包含所有必需组分，使EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒既方便又经济。

背景信息

体内富集与蛋白质复合的RNA，然后进行qPCR和/或下一代测序，为研究表观转录组范围内的蛋白质-RNA相互作用提供了一个有利的工具。长期以来用于实现这一目标的主要方法是传统的RIP（RNA免疫沉淀）后跟PCR（RIP-PCR）或测序（RIP-Seq）。这些方法已被广泛使用，但无法实现高分辨率，需要交联，并且存在重复性差和过程复杂的问题。特别是，这些方法耗时（从8小时到2天）且成本高昂。

原理与程序

该试剂盒提供了所有必要的试剂，以富集RNA结合蛋白特异性RNA复合物，通过qRT-PCR或NGS从各种细胞样本中分析蛋白质-RNA相互作用。在这个检测中，细胞被渗透处理，并用针对感兴趣蛋白的RIP级抗体处理。然后，一种独特的核酸裂解酶混合物选择性地切割目标蛋白区域周围的RNA序列，移除非特异性RNA-蛋白复合物。只有抗体结合的复合物被选择性保留。捕获的蛋白/RNA复合物中的RNA片段被纯化，可以直接用于qRT-PCR或cDNA库构建，以分析蛋白质和RNA之间的相互作用。

起始材料

起始材料可以包括各种哺乳动物细胞样本，如培养瓶或培养板中的培养细胞、原代细胞、从血液、体液中分离的稀有细胞群体、新鲜/冷冻组织，以及从整个细胞群体中分选的特定细胞和胚胎细胞等。