Norgen：尿液样本提取纯化试剂盒

液体活检（Liquid biopsy）是传统组织活检的非侵入性的替代方法，样本类型包括血液、血浆/血清、脑脊液、尿液、唾液等。液体活检样本含有非常低浓度的无细胞核酸以及细胞外囊泡/外泌体。

液体活检有助于癌症研究：无细胞核酸“生物标志物（biomarkers）”可用于检测和监测肿瘤发展；

（1）细胞凋亡或坏死引起的细胞死亡会导致细胞内容物泄漏到循环系统（cfDNA/cfRNA 来源）；

（2）允许检测健康细胞 VS 疾病状态细胞。

尿液作为液体活检的样本类型：

（1）血液中存在的所有物质都会通过肾脏的过滤，并可以在尿液中排出=实时健康状况；

（2）含有多种成分，如循环肿瘤细胞、RNA、ctDNA、EVs、脱落细胞、蛋白质、代谢物；用于疾病检测和诊断的重要生物标志物。

尿液成分：

①细胞DNA和cfDNA——可用于胎儿DNA筛查；

②循环肿瘤DNA——用于疾病监测和治疗结果；

③细胞RNA和cfRNA（miRNA）——生物标志物发现；

④蛋白质——监测疾病状态；

⑤外泌体RNA——生物标志物发现。

与血液相比的特点：

①非传染性；

②类似于血浆/血清的核酸谱；

③易于处理；

④蛋白质浓度低；

⑤非侵入性；

⑥没有用于分析前处理的标准化protocol。

Norgen Biotek为尿液DNA和RNA研究提供完整的工作流程解决方案：

样品保存：

（1）样本通常在二级设施中收集，温度为-70℃；

（2）由于在收集阶段时核酸的快速降解和微生物的生长，尿液必须在运输前立即处理或冷冻；（尿液中的cfDNA主要通过核酸酶活性降解；尿液中的细菌生长）；

（3）尿液样本变化很大，并受健康状况和收集时间等因素的影响。

冷冻尿液的坏处：

（1）丰富的蛋白质的沉淀 = 核酸的显著损失；

（2）细胞破裂 = 基因组核酸污染；

（3）冷链运输 = 昂贵，困难

（4）Norgen的收集和保存尿液的产品可以保存：①DNA、cfDNA；②脱落的细胞；③RNA、cfRNA；④细菌细胞；⑤外泌体；⑥病毒；⑦同时灭活细菌、真菌和病毒。

（5）相比于其他竞争对手：Norgen保存分析物的时间室温下2 年以上。

Norgen的尿液样本分离提取试剂盒：Norgen根据样本类型提供专门的RNA和DNA试剂盒；

使用Norgen尿液提取试剂盒的优势：

（1）无苯酚氯仿；

（2）无载体RNA；

（3）为任何下游应用提供无抑制剂样品；

（4）无分子量区别或GC序列偏好；

（5）捕获用于生物标志物研究中的小RNA。

浆液形式（Slurry）VS 柱提法（Spin Column）:

Norgen基于专利的碳化硅树脂技术，提供2种形式：浆液形式（Slurry）与柱提法（Spin Column）

（1）浆液形式（Slurry）通常用于大体积的血浆、血清和尿液；样品与悬浮在缓冲液中的树脂混合；

（2）对于新客户，我们通常推荐柱提法（Spin Column）；样品通过预先装有树脂的色谱柱。

尿液RNA纯化：

（1）从各种尿样体积中分离RNA；

（2）简单、快速的protocol；

（3）可用于选择性分离外泌体RNA、cfRNA、基因组/细菌RNA或总RNA的试剂盒；

（4）无苯酚-氯仿；

（5）无载体RNA；

（6）无抑制剂RNA；

尿液DNA纯化：

（1）从各种尿样体积中分离DNA；

（2）简单、快速的protocol；

（3）可用于选择性分离cfDNA、基因组/细菌DNA或总DNA的试剂盒；

（4）无苯酚-氯仿；

（5）有效去除PCR抑制剂。

尿液外泌体纯化：

• 完整尿外泌体的纯化和富集；

• 多样化的尿样输入量；

• 无需耗时的超速离心；

• 无沉淀试剂或过夜孵育；

（5）与多物种的尿液兼容；

（6）不含RNA结合蛋白；

（7）适用于多种下游应用。

Norgen的尿液外泌体纯化与超速离心法（外泌体纯化金标准）：

与超速离心相比，Norgen 的外泌体纯化技术产生更高纯度和尺寸特异性的外泌体。

核酸定量：

（1）常规核酸质量检测方法不够灵敏；

（2）尿液和其他类型的液体活检样本中的cf-DNA和cf-RNA含量非常低；

（3）尿液中cf-DNA或cf-RNA的典型产量为 1-100 pg/μL (~0.001 - 0.1ng/uL)；

（4）因此，无法使用典型的DNA/RNA定量方法（特别是 Nanodrop）进行定量；

（5）低丰度RNA的定量：请参阅Application Note 47 - Revised Guidelines for RNA Quality Assessment for Diverse Biological Sample Input.

艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐独家代理Norgen Biotek品牌的各种尿液样本提取纯化试剂盒。产品仅限用于科研学术研究用途，不得用于医疗与诊断。

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