Biosensis 示踪试剂-可视化神经退行性疾病通路

Biosensis提供了大量已建立且特性良好的示踪试剂，用于检测退化神经元（Fluoro-Jade B和C）、淀粉样斑块（Amylo-Glo和HQ-O）以及正常和致病的髓鞘（Black Gold II）。这些染色试剂是出色的研究工具，为研究神经退行性疾病通路和疾病修饰药物提供了最大的灵活性。

Biosensis 示踪试剂具有几个关键优势：

• 在高影响力期刊上发表过大量文章 – 质量得到同行的验证

• 详细的方案 – 易于使用的试剂保证有效

• 出色的技术支持 – 确保您的实验成功

• 灵活性 – 与各种组织类型、染色技术和现有抗体免疫染色方案兼容

使用 Fluoro-Jade B 和 C 鉴定退化神经元

神经元变性的原因和影响是各种神经科学家的主要兴趣。与这种兴趣相对应的是越来越多的适用于检测神经元变性的方法。Fluoro-Jade B （FJB） 和 C （FJC） 示踪试剂可对所有退化神经元进行染色，无论细胞死亡的具体损伤或机制如何。

左图：老年糖尿病大鼠海马体 CA3 区退化神经元的Fluoro-Jade C （FJC） 染色（绿色）。蓝色：DAPI 细胞核染色。图片由 Wang 博士及其同事提供 （Wang S. et al. （2020））。

右：使用蓝色和紫外线落射荧光联合照明对暴露于红藻氨酸的扣带回大鼠皮层的表层进行双重曝光。第 I 层包含明显的 Fluoro-Jade C 阳性退化轴突末端。第 II 层包含密集堆积的 DAPI 阳性活颗粒细胞。第 III 层包含 FJC 阳性去壳锥体细胞和 DAPI 阳性活锥体细胞的混合物。照片由 Larry Schmued 博士提供。

FJC 表现出最大的信噪比和最高的分辨率。这转化为对退化神经元具有最大对比度和亲和力的染色，使其成为定位退化神经细胞体以及远端树突、轴突和末端的理想选择。该染料具有很强的抗褪色性，并且几乎与所有组织学处理和染色方案兼容。

荧光染料 Fluoro-Jade B （FJB） 与其纯化程度更高的兄弟 FJC 一样，是一种阴离子荧光素衍生物，可用于对正在变性的神经元进行组织学染色。FJB 与 FJC 的不同之处在于，它是一种略不精细的化学配方，因此它不能提供与 FJC 相同水平的信噪比或高分辨率。尽管如此，FJB 仍然被广泛使用，并且作为退化神经元甚至神经胶质细胞的标志物效果非常好（参见 Damjanac M 等人，2007 年）。FJB 的方案与 FJC 几乎相同，并且 FJB 与其他几种标记程序兼容，包括免疫荧光和荧光尼氏技术。

Biosensis Fluoro-Jade B 和 C 示踪试剂有以下规格可供选择：

注意：TR-150-FJ 相当于 Merck-Millipore 的停产产品 AG310，R-160-FJ相当于 Merck-Millipore 的停产产品 AG325。

用 Amylo-Glo 和 HQ-O 识别淀粉样蛋白斑块

Amylo-Glo 即用型稀释 （RTD） 染色试剂 （TR-300-AG） 设计用于对组织切片中的淀粉样蛋白斑块进行染色。由于其独特的化学和光谱特性，该标记物与其他常规标记物（如硫黄素 S 和刚果红）相比具有几个优势（Schmued L等人，2012 年）。使用 Amylo-Glo 在生理条件下会产生非常亮的蓝色紫外线激发染色剂，当用其他滤光片照射时不会渗出。其亮度使其成为低倍率定量研究的理想选择，而其独特的激发/发射曲线和温和的染色条件使其成为多种免疫荧光标记研究组合的理想选择。Amylo-Glo RTD 与新鲜、冷冻和福尔马林固定的免疫组织化学或免疫细胞化学兼容，由于其高荧光强度、高抗光漂白性和独特的紫外通道荧光特性，它特别适用于共聚焦和多重标记。

左图：三重暴露允许在 AD/Tg 小鼠的海马体中同时定位 Amylo-Glo 阳性淀粉样蛋白斑块（蓝色）、GFAP 阳性肥大星形胶质细胞（绿色）和活化的小胶质细胞（红色）。紫外线、蓝光和绿光照明相结合。

右：在 AD/Tg 小鼠海马的齿状回区域用溴化乙锭尼氏（细胞体）复染剂（红色）标记淀粉样斑块（蓝色）的淀粉样蛋白斑块（蓝色）。

含 EtBr 复染剂的 Biosensis Amylo-Glo RTD 淀粉样蛋白斑块染色试剂 （TR-400-AG） 试剂盒利用溴化乙锭复染剂，以一种快速有效的方式可视化细胞核和细胞体，同时在紫外线照射下，可一步评估淀粉样蛋白斑块和细胞/组织定位。

HQ-O 即用型稀释 （RTD） 示踪试剂设计用于标记石蜡包埋或新鲜切割的冷冻组织切片中的淀粉样斑块。作为一种荧光锌螯合剂，HQ-O 是独一无二的，因为它利用了淀粉样蛋白斑块中已知存在的浓缩锌。对 HQ-O 的研究表明，只有在锌存在下聚集合成的 Aβx-42 时，才能看到荧光斑块状结构。在蓝光激发下，斑块结构在脑实质中呈亮绿色荧光，与 Aβ 抗体染色后观察到的斑块结构密切相关。HQ-O RTD 染色试剂与其他荧光基团兼容，如 DAPI、Hoechst 和溴化乙锭，以及荧光显微镜发射光谱在蓝色和/或红色发射范围内的荧光标记抗体。由于其锌螯合特性，HQ-O RTD^TM染色试剂可以显示血管内的球状结构和血管内白细胞。

D：在海马体的 CA4 区域内，使用 GFAP 抗体进行共标记证明了肥大的星形胶质细胞（橙色）与它们通常周围的淀粉样斑块（绿色）之间的关系。用 TRITC 荧光团观察 GFAP 免疫反应性。

E：在阿尔茨海默病患者的皮层中可以看到三个淀粉样斑块（绿色）。

F：人类 AD 患者皮层中的血管斑块示例。

HQ-O RTD 染色试剂与硫黄素 S 等旧的蓝光激发染色剂相比具有多种优势：

• HQ-O 与淀粉样蛋白原纤维和噬菌斑结合，无需通过独特的锌结合特性进行确认

• 与硫黄素 S、硫黄素 T 和刚果红相比，具有更高的对比度和分辨率

• 具有紧密的激发和发射光谱，无激发物渗漏，可轻松进行清晰的多重标记研究

• 使用常见的蓝光（FITC 荧光）滤光片 （E_麦克斯475 纳米）

• 与 FFPE 和冷冻组织切片兼容

• 比任何其他非紫外线淀粉样染料更容易、更锐利、更亮！

Biosensis 淀粉样蛋白噬菌斑示踪试剂有以下规格可供选择：

用Black-Gold II鉴定正常和致病的髓鞘

Black-Gold II 是一种盐代磷酸盐复合物，可将髓鞘定位在中枢神经系统内。Black Gold II 即用型稀释 （RTD） 染色试剂盒可定位髓鞘，包括单个纤维和髓束，并可选择通过甲苯胺蓝复染剂共定位细胞体。黑金 II 标记的有髓纤维在明场照明下看起来几乎是黑色的，而甲苯胺蓝 O 标记的细胞尼氏体是蓝色的。

Black Gold II 可以显示和表征与暴露于多种神经毒物相关的特定髓鞘变化，包括红藻酸、软骨藻酸、3-硝基丙酸、氟金和异烟肼。Black Gold II 还可以与其他组织化学标志物结合使用，包括尼氏染色、逆行转运荧光示踪剂和神经元变性的荧光标志物。Black-Gold II 的相关优势包括高分辨率、高对比度、组织化学处理时间短、多功能性和一致的可重复性。

左图：8 个月大的 Ad-Tg 小鼠海马体的明场照明 （60X）。髓鞘病理可以在淀粉样蛋白斑块内和周围观察到。相邻颗粒和多晶型细胞的细胞体呈蓝色，而单个髓鞘纤维呈近黑色。照片由 L. Schmued 博士提供。

右：延髓中人脑 K 位点降钙素基因相关肽样免疫反应性（黑色）和髓鞘染色（红色，Black-Gold II 染色试剂盒，Biosensis），显示背柱核 Locus K 和脊髓三叉神经质明胶的相似神经化学和结构组织（Del Fiacco M. et al.， 2018）。

Biosensis正常和致病性髓鞘示踪试剂有以下大小可供选择：