Biogradetech：EZMeta 活性氧 (ROS) 含量检测试剂盒 (荧光法)

活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）是氧正常代谢的天然副产物，细胞内产生的一类高活性分子，包括超氧阴离子（O^2-）、过氧化氢（H₂O₂）、羟基自由基（·OH）等，在细胞信号传导和体内平衡中起重要作用。活性氧（ROS）是适量的ROS在细胞中发挥重要的信号传递和调节作用，但过高的ROS水平会导致氧化应激和细胞损伤。因此，准确测量ROS含量对于研究细胞生理过程、疾病发生机制以及药物筛选具有重要意义。

ROS 的积累会严重破坏细胞结构。在氧化应激相关状态下，ROS 水平可以大大增加。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎症性疾病，以及神经退行性疾病和癌症的研究发挥重要的作用。ROS 检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。在ROS含量检测中，荧光法成为一种常用且可靠的方法。现代科技的发展使得我们可以利用ROS荧光检测试剂盒快速、准确地测量ROS含量。这些检测试剂盒基于荧光染料与ROS的特异性反应，通过检测荧光信号的强度来定量测量ROS水平。

EZMeta 活性氧 (ROS) 含量检测试剂盒 (荧光法) 提供了一种简单、灵敏、快速的 ROS 检测方法，产品基本信息如下。

【产品基本信息】

货号：D-AKC1910

规格：50T / 100T

适用样本：适用于贴壁细胞和悬浮细胞

储存：-20℃保存12个月

应用：荧光显微拍照、流式细胞分析

【产品基本原理】

利用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测，DCFH-DA (二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯) 可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 无荧光且不能通透细胞膜，其可以被细胞内的活性氧（ROS）氧化生成有荧光的 DCF，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测和观察活细胞内 DCF 的荧光信号强度，即可以分析细胞活性氧的水平。

荧光探针DCFH-DA（2',7'-二氯二氟荧光素醋酯）是一种常用于检测细胞内活性氧（ROS）水平的荧光探针。DCFH-DA是一种无荧光的化合物，可以通过细胞膜进入细胞内。在细胞内，DCFH-DA会被内源酯酶水解成DCFH（2',7'-二氯二氟荧光素），并且DCFH可以被ROS氧化成强荧光产物DCF（2',7'-二氯荧光素）。其荧光强度与ROS水平成正比。因此，通过测量DCF的荧光强度，可以间接反映细胞内ROS水平的变化。

【产品注意事项】

1. 阳性对照推荐初始使用浓度为 50 μM（推荐浓度 50-250 μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。

2. 实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照 1:2,000-1:5,000 稀释荧光探针 DCFH-DA，使 DCFH-DA 的终浓度为2-5 μM。探针装载的时间可在 15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。

3. Positive Control (50 mM) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。

4. 探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。

5. 尽量缩短探针装载后到检测所用的时间（刺激时间除外），以减少各种可能的误差。

需要注意的是，DCFH-DA的使用也存在一些限制和注意事项。首先，DCFH-DA的荧光信号受到许多因素的影响，包括细胞内的非特异性酯酶活性和其他氧化状态的影响。因此，在使用DCFH-DA时需要进行适当的对照实验和数据分析。此外，DCFH-DA的稳定性较差，容易受到光、氧和温度等因素的影响，因此在使用过程中需要注意保护。

【产品应用优点】

1.高灵敏度：能够在细胞水平上精确地测量ROS的变化，从而更好地理解其在生物过程中的作用。

2.快速操作：试剂盒操作简单快捷，相比于传统的ROS检测方法，荧光法检测试剂盒大大节省了实验时间，提高了实验效率。

3. 安全可靠：这些检测试剂盒使用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测，无需使用放射性物质，减少了实验风险和对环境的影响。同时，荧光法检测结果稳定可靠，具有较低的误差和较高的重复性。

【相关产品推荐】

总之，活性氧（ROS）含量检测试剂盒的荧光法是一种快速、准确的测量ROS水平的方法。它的高灵敏度、快速操作、安全可靠使其成为研究人员在ROS研究中的重要工具。无论是揭示细胞信号通路、疾病机制的研究，还是药物研发和环境毒性评估，这些荧光法检测试剂盒都为我们提供了有力的支持，推动了科学研究的进展。

作为Biogradetech在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Biogradetech以及客户订制化服务。Biogradetech致力于为客户提供高质量的产品和服务，是那些寻求高质量试剂和可靠结果的人值得信赖的合作伙伴。 欢迎大家随时联系我们。